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本实验基于声动力学疗法对肿瘤细胞的增殖活性存在两种抑制作用模式(直接杀伤和诱导凋亡)的研究基础之上,采用频率为1.34MHz,强度为3W/cm~2高频聚焦超声激活血卟啉处理S180腹水型肿瘤细胞,在处理后的不同时间段取材,并通过免疫细胞化学等方法检测在超声激活血卟啉的杀伤和诱导凋亡的协同作用下,与肿瘤细胞增殖活性、凋亡调节、基因复制能力、转录活性、蛋白质合成等密切相关的几种核内蛋白质和关键酶的表达随取材时间的动态变化,利用专业图像分析软件和统计学软件对它们表达的变化进行分析处理,得到差异显著性分析结果并给予生物学意义上的合理解释。不同的检测指标的变化也间接的反映了声动力学疗法对肿瘤细胞核内基因表达活动的影响。总之,本实验研究进一步为声动学疗法抑癌机制的阐明,积累科学的数据和有益的资料。通过实验得到如下结果: 1.分子生物学研究表明,核仁组成区嗜银蛋白是与具有转录活性rRNA基因相结合的一类高度磷酸化的酸性非组蛋白,该蛋白表达量的强弱和形态学的变化可以间接反映细胞内rDNA转录活性的水平、以及核仁组成区结构和功能的变化。实验结果表明:SDT疗法对嗜银蛋白表达有明显的抑制作用,使肿瘤细胞的增殖活性受到显著的抑制。 2.增殖细胞核抗原(PCNA)是DNA聚合酶δ的辅助蛋白,是真核生物细胞DNA合成所必需的核蛋白,其合成和表达与细胞的增殖状态有关。此外,该蛋白还在DNA修复过程中起到重要的作用。实验结果表明,SDT疗法对肿瘤细胞的增殖细胞核抗原表达的具有显著抑制作用,可直接影响到肿瘤细胞核内DNA的合成、复制、修复过程,从而进一步抑制了肿瘤细胞的增殖活性。 3.突变型p53蛋白不仅丧失了野生型p53蛋白对细胞增殖、细胞周期进程的负调控能力以及抑制细胞恶性转化、促进细胞凋亡的作用,而且还干扰了野生型p53亚基的正常功能,并获得细胞转化能力,具有癌蛋白的生物功能。实验结果表明,SDT疗法对S180腹水型肿瘤细胞中突变型p53蛋白的表达有明显的抑制作用,进而使其促癌功能的发挥受到了抑制。 4.在多种人类细胞中都发现有c-myc的高度表达,它能促进细胞增殖,抑制细胞分化。近年研究表明,c-myc还参与细胞凋亡的调控.c-myc是调控细胞的周期的主要基因,能调节细胞增殖和死亡两个截然相反的过程。信号传递系统激活后,如果