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植物直接生活在复杂多变的自然环境中。干旱、盐碱、寒冷及高温等逆境是导致农作物减产的重要原因。在逆境胁迫下,植物会发生各种生理生化改变,产生活性氧,使植物受到生理伤害,严重时甚至导致植物死亡。为适应逆境,植物在漫长的进化过程中演化出了对这些逆境胁迫的应答机制,例如:气孔关闭、细胞膜及胞质成分的改变等。在对逆境胁迫基因启动子区分析的研究中,发现许多基因的启动子区含有保守序列:A/GCCGAC,即脱水应答元件(DRE)。1997年,Stocking等人用酵母一元杂交从拟南芥中分离了一个DRE/CRT结合蛋白CBF1以来,已克隆到了许多DREB相关基因(DREB-like),这些基因产物能够结合启动子区的DRE/CRT元件,启动一系列抗逆基因的表达,并赋予植物耐盐、干旱、寒冷、高温等能力。在植物抗盐基因工程领域,DREB家族基因一直备受关注,研究者通过转基因手段将DREB导入植物基因组中,得到了许多抗性增强的转基因品种。为探索DREB2ACA基因(constitutive activate DREB2A,组成型激活DREB2A基因)在植物抗盐反应中的功能及其在植物抗逆基因工程中的运用,我们用SOE-PCR(overlapping extension-PCR,重叠延伸PCR)方法克隆了DREB2ACA,并将其置于盐诱导的rd29A启动子控制下,构建了植物表达载体,并通过农杆菌介导的方法将目的基因转入烟草。RT-PCR表明,目的基因受盐胁迫诱导表达。在盐处理条件下,转基因烟草比对照具有更好的生长状态,含有较高的光合色素,具有较高的光合速率及较低的MDA含量。在盐胁迫下,外源转基因激活了烟草内源LEA基因的表达,并保持了较高的抗氧化酶活性及较高的小分子渗透保护剂脯氨酸的含量。研究表明DREB2ACA的表达提高了植物抗逆能力,该基因在抗盐领域具有广阔的应用前景。类胡萝卜素在植物生命活动中发挥着光合作用和光保护的重要功能,是植物体内不可或缺的重要物质。为了研究玉米黄素对植物的保护功能,我们通过农杆菌介导的转基因技术,在烟草中强表达了chyB基因,通过HPLC检测发现,该分子操作使烟草叶黄素循环色素(玉米黄质,堇菜黄质)提高了2-4倍。在高光强条件下,转基因植物能够将更多地β-胡萝卜素转化为玉米黄质。在紫外胁迫下,转基因植物得到了更好的保护。在干旱条件下,转基因植物叶片含有较少的MDA,说明其受到的膜氧化损伤较为轻微。与对照比较,转基因植物拥有更高的光合能力,光化学效率。进一步设计实验探讨这种保护机制,发现转基因植物有更好的抗氧化能力,但是其NPQ及ABA没有显著改变。该数据表明chyB的表达提高了植物抗旱能力。