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目的: 胃癌是消化系统常见的恶性肿瘤之一,当前主要治疗是外科手术联合放化疗,但是疗效仍不理想,患者5年生存率很低。肿瘤的侵袭和转移是其术后易复发、预后差的最主要原因,而肿瘤细胞向微血管内皮趋化迁移是肿瘤发生侵袭、转移的基础事件。本研究拟研究MTDH与胃癌转移的相关性及MTDH/AEG-1对胃癌细胞SGC-7901趋化迁移的影响。 方法: 采用免疫组化SP法检测 MTDH/AEG-1基因在30例胃癌组织及其癌旁组织和10例对照正常组织中的表达;构建针对 MTDH/AEG-1的干扰载体,转染胃癌细胞株 SGC-7901,获得稳定细胞株;采用倒置荧光显微镜观察转染效率;western blotting检测干扰效率;趋化实验(Transwell)检测沉默 MTDH/AEG-1表达的胃癌细胞株 SGC-7901向人脐血内皮细胞的趋化情况;迁移实验(Transwell)检测沉默 MTDH/AEG-1表达的胃癌细胞株 SGC-7901的迁移情况。 结果: 1.免疫组化结果显示:①MTDH蛋白在胃癌组织的表达情况:胃癌组织的MTDH蛋白表达量(86.7％)明显高于癌旁组织(36.7%)及对照正常组织(10%,均p<0.01),且胃癌组织的 MTDH以强阳性表达为主,而癌旁组织及对照正常组织均以弱阳性表达,且后者 MTDH阳性表达几乎均在肠化腺体胞质及腔缘。○2 MTDH蛋白表达与胃癌临床病理特征相关情况:III~ IV期胃癌 MTDH蛋白表达量(84.2%)明显高于 I~II期胃癌(27.3%,p<0.01);淋巴结转移组 MTDH蛋白表达量(75.0%)高于淋巴结未转移组(40.0%,p<0.05);远处转移组 MTDH蛋白表达量(90.0%)明显高于无远处转移组(33.3%,p<0.01);而与组织学分类、分化程度、年龄、性别以及肿物大小无关(p>0.05)。 2.荧光倒置显微镜镜下观结果显示:3个重组载体 pGPU6/shMTDH-1,2,3和一个阴性对照组 pGPU6/shMTDH-NC由脂质体介导成功转染胃癌 SGC7901细胞,转染效率达70%左右。 3.Western blot检测结果显示,以β-actin为内参照,转染 pGPU6/shMTDH-3质粒的 shMTDH-3干扰效率最高,干扰效率高达70%(p<0.05)。 4.Transwell趋化实验结果显示:正常组、阴性对照组和转染pGPU6/shMTDH-3质粒的 MTDH沉默组向人脐内皮细胞定向趋化的细胞数分别为55±6.7、50±5.6、20±4.5,差异具有显著统计学意义(p<0.05),阴性对照组与正常组比较无统计学差异(p>0.05)。 5.Transwell迁移实验结果显示:正常组、阴性对照组和转染pGPU6/shMTDH-3质粒的 MTDH沉默组向人脐内皮细胞定向迁移的细胞数分别为78±8.9、70±7.5、30±6.7,差异具有显著统计学意义(p<0.05),阴性对照组与正常组比较无统计学差异(p>0.05)。 结论: MTDH/AEG-1与胃癌的发生发展和侵袭转移相关;沉默MTDH/AEG-1基因蛋白表达可抑制胃癌细胞 SGC-7901的趋化和迁移能力,MTDH/AEG-1基因可能参与了胃癌转移的调控。