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金属硫蛋白1H(Metallothionein1H,MT1H)在许多肿瘤中表达下降,包括肝细胞肝癌(hepatocellular cancer,HCC)。可是MT-1H在HCC中具体起什么生物学功能以及潜在机制仍然不明确。本研究目的就是试图通过体外实验、动物实验等进一步阐述MT-1H在HCC表达状态、其生物学功能以及潜在分子机制。我们检索了 TCGA数据库以及应用RT-PCR方案检测了 12对HCC标本以及周边的非肿瘤组织标本的MT-1HmRNA表达水平。之后通过质粒转染获得稳定表达MT-1H的细胞株以及空载体细胞株作为对照,行MTT分析、克隆形成试验、EDU核素掺入试验,以及TRANSELL迁移和侵袭试验、划痕试验以明确MT-1H对HCC细胞增殖、侵袭、迁移的影响。生物信息学分析、荧光素酶报告分析、RT-PCR、Western blotting、细胞免疫荧光技术等探索MT-1H对HCC细胞作用的可能机制。活体裸鼠成瘤实验检测MT-1H在活体的抗增殖活性。通过检索TCGA数据库,结果提示MT-1H在HCC表达下调。以及我们自行留取的12对HCC肿瘤和非肿瘤组织检测MT-1HmRNA水平,结果显示肿瘤组织的MT-1H mRNA表达明显下降。获得性功能试验结果提示MT-1H异常过表达可以抑制肝母细胞瘤细胞系HepG2和Hep3B增殖、侵袭和迁移。基因富集分析显示MT-1H可能涉及到Wnt/β-catenin通路的调节,一部分下游基因表达在MT-1H高表达和低表达组存在明显差异。Western blotting分析和细胞免疫荧光结果显示核内β-catenin蛋白含量在MT-1H过表达细胞明显减少。Top/Fop报告分析证实MT-1H确实对Wnt/β-catenin转录活性有抑制作用。RT-PCR显示MT-1H过表达可导致β-catenin的三个目标靶基因MYC,MMP7,和LEF1等基因mRNA表达明显减少。Western blotting分析显示MT-1H细胞磷酸化的Akt/GSK-3 β蛋白表达水平都较空载体细胞显著下降,而总的Akt/GSK-3 β蛋白表达和空载体细胞则无明显差异,因此提示MT-1H可能是通过抑制Akt/GSK-3 β磷酸化达到调节Wnt通路的。本研究结果显示MT-1H过表达可以抑制β-catenin向核内转移和可能通过Akt/GSK-3 β轴调节Wnt/β-catenin通路。活体成瘤实验证实在活体MT-1H同样有抑制HCC细胞的增殖的能力。本研究证实MT-1H可能通过调节Wnt/β-catenin通路在HCC发挥肿瘤抑制作用,因此MT-1H可作为HCC靶向治疗的一个潜在靶点。