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实验通过血竭素高氯酸盐、乳香酸、没药提取物对NIH-3T3细胞的干预作用,检测NIH-3T3细胞的安全用药范围、细胞生长曲线、细胞周期时相变化、细胞上清中胶原蛋白、细胞上清中MMPs/TIMPs(MMP-1、MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2)等指标,探讨防腐生肌散促进创伤愈合的机理。该研究以NIH-3T3细胞为研究对象,采用MTT比色法观察血竭素高氯酸盐(DP)、乳香酸(MA)、没药提取物(ME)对NIH-3T3的细胞毒性作用和细胞生长曲线;采用流式细胞术检测NIH-3T3细胞周期的变化;利用羟脯氨酸试剂盒检测NIH-3T3细胞中胶原含量的变化;采用ELISA法检测NIH-3T3细胞分泌MMP-1、MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2的含量。实验结果表明:(1)血竭素高氯酸盐、乳香酸、没药提取物对NIH-3T3细胞的安全用药浓度分别是:0.3125μg/L～40μg/L、125mg/L～8g/L、1.95mg/L～2g/L。在三种中药成分干预NIH-3T3细胞48h内,血竭素高氯酸盐明显地抑制细胞增殖,与对照组比差异极显著(P<0.01),而乳香酸和没药提取物明显促进细胞增殖,与对照组比差异极显著(P<0.01);各中药成分干预NIH-3T3细胞48h后对细胞增殖无影响。(2)随着干预时间的延长,血竭素高氯酸盐能明显地增高NIH-3T3细胞凋亡率,降低其存活率,具有统计学意义;乳香酸和没药提取物明显地降低细胞凋亡率,增高细胞存活率,与对照组相比差异极显著(P<0.01)。(3)血竭素高氯酸盐干预24h明显地促进胶原蛋白的合成,而干预细胞48h显著性降低了胶原蛋白含量,与对照组比差异极显著(P<0.01);乳香酸干预24h时极明显地促进胶原蛋白的合成,与对照组比有极显著性差异,而在干预48h时胶原合成的能力降低,其含量与对照组无差异;没药提取物干预NIH-3T3细胞24h后抑制胶原蛋白的合成,差异极显著(P<0.01),48h后促进胶原合成,但与对照组相比无统计学意义。(4)除对照组中MMP-2的产生与时效差异不显著外,各中药组和对照组中MMP-1、MMP-9、TIMP-1及TIMP-2的产生均与时效有统计学意义(P<0.01)。结论:半数有效浓度的三种中药成分干预NIH-3T3细胞48h后,血竭素高氯酸盐能抑制NIH-3T3细胞增殖和胶原合成,促进NIH-3T3细胞凋亡,并能抑制TIMP-2、TIMP-1、MMP-1的表达,促进MMP-2、MMP-9的表达;乳香酸能促进NIH-3T3细胞增殖及持续合成胶原,抑制NIH-3T3细胞凋亡,并能促进MMP-2、MMP-9的表达,抑制MMP-1、TIMP-1、TIMP-2的表达;有效浓度的没药提取物促进NIH-3T3细胞增殖及胶原合成,抑制NIH-3T3细胞凋亡,并能促进MMP-2、MMP-9的表达,抑制MMP-1、TIMP-1、TIMP-2的表达。