富油微藻中油脂的提取及DHA富集纯化的研究

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多不饱和脂肪酸(PUFAs)对人体具有独特的保健功能,其中以二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)为代表的ω-3 PUFAs由于在提升大脑敏锐度、改善视力等方面功效卓著更是成为当前研究的热点。但目前EPA和DHA的传统鱼油来源已经不能满足人们的需求,海洋微藻作为富含油脂和PUFAs的植物是理想的替代来源。同时微藻作为新兴的含油植物,与传统油料作物相比具有含油量高、生长周期短、不受场地季节限制、易于大规模培养等优点,可作为制备生物质燃料的良好原料。在获取EPA和DHA的同时从微藻中提取油脂制备生物柴油,是一种综合开发、降低成本的有效途径。本文采用传统索氏提取法和超临界CO2萃取法对微藻中的油脂进行提取,进而对微藻油脂中的DHA进行富集提纯,并考察了微藻油脂的物性,为后续以微藻油脂制备生物柴油的研究奠定基础。首先建立了微藻油脂的气相色谱内标分析方法,对微藻中的DHA含量进行定量分析。采用索氏提取法提取微藻油脂,考察了不同极性溶剂、提取时间等因素的影响。综合考虑油脂得率和溶剂的安全性,选择95%乙醇作为适宜溶剂,适宜的提取时间为8h,该条件下油脂提取率达到44.87%,DHA含量为15.73%,DHA提取率7.06%。实验结果还显示,不同提取溶剂提取的油脂中DHA含量相差不大。超声和微波辐射两种预处理方法均能使微藻油脂提取率有显著提高,达到60%以上,同时具有处理时间短、操作方便的优点。在特定超声处理条件下(80W,15min),油脂中DHA含量提高到24.77%;但微波预处理方法则导致DHA含量普遍下降。因此,两种预处理方法中,超声法适用于从微藻中提取DHA;但从获得微藻油脂生产生物柴油角度考虑,超声和微波辐射两种方法对破碎微藻细胞、提高出油率均是有效的。采用超临界CO2萃取微藻中油脂的适宜条件为:2h、35MPa、40℃、95%乙醇作为夹带剂、夹带剂:原料=1:1 (w/w)。该条件下得到油脂提取率、油脂中DHA含量、DHA提取率分别为33.88%、27.49%及9.31%。超临界萃取法得到的微藻油脂虽然在总油脂提取率上低于索氏提取法,但在DHA纯度、油脂颜色、气味以及产品品质上具有更大优势。在超临界萃取法适宜工艺下,超声强化-超临界CO2萃取得到的油脂提取率及DHA含量无显著增加,但萃取时间缩短至1h。采用尿素包合法对压榨微藻毛油中的DHA进行富集提纯,得到优化的包合条件为:尿素脂肪酸比例2:1、包合时间8h及包合温度-10℃。在该条件下,DHA的纯度从29.65%提高到60.43% ,DHA的富集率为60.64%。
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