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为检测鸭α干扰素(IFN-α)真核表达质粒(pcDNA-DuIFN-α)对DVH弱毒苗免疫鸭的细胞免疫调节作用,本实验将鸭α干扰素真核表达质粒(pcDNA-DuIFN-α)以50μg、100μg、200μg肌肉注射和1μg、3μg、6μg基因枪轰击分别免疫28日龄北京鸭,15 d后免疫鸭病毒性肝炎(DVH)弱毒疫苗,同时设空载体+DVH弱毒疫苗、生理盐水、DVH弱毒疫苗以及pcDNA-DuIFN-α免疫鸭对照组,10只/组,于DVH弱毒疫苗免疫后5、7、14、21、28、42、56、70 d采用流式细胞仪(FACS)、淋巴细胞增殖试验(MTT法)分别对免疫鸭外周血的CD3~+淋巴细胞总数、T淋巴细胞转化能力进行动态检测,取得如下实验结果:1.CD3~+淋巴细胞数量:①肌肉注射:50μg、100μg和200μg的pcDNA-DuIFN-α分别与DVH弱毒疫苗联合免疫后7-56 d极显著(P≤0.01)高于生理盐水对照鸭,7-42 d,100μg组极显著(P≤0.01)、50μg和200μg组显著高于(P≤0.05)空载体+DVH弱毒疫苗、DVH弱毒疫苗及其pcDNA-DuIFN-α组。100μg组于7-42 d显著(p≤0.05)高于50μg和200μg组,50μg组于14-28 d略高于200μg组。②基因枪轰击:1μg、3μg和6μg的pcDNA-DuIFN-α分别与DVH弱毒疫苗联合免疫后7-56 d极显著(P≤0.01)高于生理盐水对照鸭,3μg组于21-56 d、1μg和6μg组于21 d极显著(P≤0.01)高于空载体+DVH弱毒疫苗、DVH弱毒疫苗及其DcDNA-DuIFN-α组,3μg组于28-42 d略高于1μg和6μg组,1μg组于7-14和28-56 d略高于6μg组。③肌肉注射和基因枪轰击的比较:100μg肌肉注射组于14-21 d显著(P≤0.05)高于基因枪轰击的3个剂量组;1μg、3μg和6μg基因枪组于21 d显著(P≤0.05)高于200μg肌肉注射组。④对照组间的比较:DVH弱毒疫苗、pcDNA-DuIFN-α和空载体+DVH弱毒疫苗组间差异不显著,于7-56 d极显著(P≤0.01)高于生理盐水对照组。2.T淋巴细胞对ConA的反应能力(OD值):①肌肉注射:50μg、100μg和200μg的pcDNA-DuIFN-α分别与DVH弱毒疫苗联合免疫后5-70 d极显著(P≤0.01)高于生理盐水对照鸭,21-56 d极显著(P≤0.01)高于空载体+DVH弱毒疫苗、DVH弱毒疫苗及其pcDNA-DuIFN-α组。50μg、100μg和200μg组间差异不明显,5-14 d和28-42 d时50μg和100μg组略高于200μg组。②基因枪轰击:1μg、3μg和6μg的pcDNA-DuIFN-α分别与DVH弱毒疫苗联合免疫后5-70 d极显著(P≤0.01)高于生理盐水对照鸭,3μg组于14-42 d极显著(P≤0.01)、1μg和6μg组于21-42 d显著(P≤0.05)高于空载体+DVH弱毒疫苗、DVH弱毒疫苗及其pcDNA-DuIFN-α组,3μg组于14-42 d显著(P≤0.05)高于1μg和6μg组,1μg和6μg组差异不显著,14-28 d,6μg组略高于1μg组。③肌肉注射和基因枪轰击的比较:3μg基因枪轰击组于21 d略高于肌肉注射的3个剂量组,50μg和100μg肌肉注射组于28-70 d、200μg组于42-70 d显著(P≤0.05)高于1μg和6μg基因枪轰击组。④对照组间比较:DVH弱毒疫苗、pcDNA-DuIFN-α和空载体+DVH弱毒疫苗组间差异不显著于5-56 d极显著(P≤0.01)高于生理盐水对照组,DVH弱毒苗和空载体+DVH弱毒苗组于14-42 d略高于pcDNA-DuIFN-α组,空载体+DVH弱毒苗组于21-56 d略高于DVH弱毒苗组。研究表明,鸭α干扰素真核表达质粒能显著增强鸭细胞免疫力,并能显著增强DVH弱毒疫苗诱导的鸭细胞免疫力,是一种优良的细胞免疫分子增强剂和DVH弱毒疫苗诱导的细胞免疫分子佐剂,以pcDNA-DuIFN-α肌肉注射100μg/只、基因枪表皮轰击3μg/只的效果最佳。