研究背景与目的:大面积深度烧伤患者由于自体皮源不足,创面不能及时封闭,易引发全身严重感染。国内外学者针对这一难题进行了大量研究,如表皮细胞膜片培养,自异体角质形成细胞混合培养及复合皮的研究等。但总体而言,临床上目前可以选用的技术十分有限,包括大张异体(种)皮开洞嵌植小块自体皮、大张异体(种)皮覆盖自体微粒皮移植等,对于特大面积深度烧伤患者,皮源极度缺乏,仍难以及时有效的封闭创面。因此如何及时有效地封闭烧伤创面是临床上正在不断探索,尚未完全解决的问题。烧伤创面的愈合是一个复杂的生物学过程,分为炎性反应、肉芽组织形成、再上皮化及伤口闭合后塑形三个阶段,是一个有序的变化过程。在该过程中,脂肪组织扮演多重角色,如能量储存、脂蛋白的分解代谢、合成和释放瘦素(Leptin,Lp)与白介素6 ( interleukin 6, IL-6)等许多激素信号,产生营养改变,而营养又在多个水平上影响脂肪组织代谢,从而影响愈合进程。目前对于脂肪组织的内分泌特性与多分化潜能的研究已成为国际热点,但都停留在实验室研究阶段。国内304医院方利君、付小兵等利用小型香猪建立全层皮肤缺损动物模型,证实自体脂肪移植到局部皮肤创面后能明显促进创面愈合速度,提高愈合质量。我们率先开展了自体脂肪颗粒与自体微粒皮混合移植修复深度烧伤创面的临床研究。以大面积深度烧伤患者为研究对象,在自体微粒皮移植中添加自体脂肪颗粒,观察对深度烧伤创面的愈合有无促进作用,以及创面愈合后对关节功能有无改善作用,并初步探讨其机制,为研究脂肪组织在烧伤创面愈合中的作用提供试验依据。试验方法:符合条件的20病例,按照入院先后顺序编号,自身对照,将双侧肢体(或躯干)创面随机分为试验组与对照组,对照组采用自体微粒皮移植,试验组采用自体微粒皮+脂肪颗粒(按照体积比1:1)混合移植,自体微粒皮移植面积扩展比为15:1。观察指标如下:1.创面愈合率:分别于移植术后30天、45天、60天,透明膜覆盖创面,标记笔勾画已愈合部分,异体皮未脱落部分作未愈合处理,沿创缘画膜,数码相机照相后图像处理软件计算已愈合部分与总创面部分比值,即创面愈合率。2.关节活动度:分别于移植术后30天、60天、90天测定关节自主活动最大角度及关节达到自主活动最大角度的30秒内活动次数。关节自主活动最大角度是关节由最大伸直状态到最大弯曲状态所形成的角度。3.创面收缩率:分别于术后即刻、术后7天、35天、70天测定创面的面积,透明膜覆盖创面,沿创缘画膜,剪膜,刻度尺标记,图像分析软件测量创面面积。创面收缩率=(术后即刻创面面积—检测时创面面积)÷术后即刻创面面积×100%。4.组织学观察:分别于移植术后7天、14天、21天、28天切取小块创面组织作组织切片,体积分数4%甲醛固定,石蜡包埋,HE染色光镜下观察新生上皮的厚度、胶原纤维的排列,PCNA免疫组织化学染色光镜下观察观察阳性细胞数。结果:1.创面愈合率:移植术后30天、45天、60天试验组创面平均愈合率(56.31±3.10)%、(76.40±6.12)%、(96.25±1.52)%,均明显高于对照组(28.31±1.98)%、(47.30±4.76)%、(85.38±2.15)%(p<0.01 )。2.关节活动度:(1)移植术后30天、60天、90天试验组肘/膝关节自主活动最大角度平均为(38.3±4.62)°、(55.37±7.07)°、(61.57±8.12)°,均明显大于对照组(20.1±2.83)°、(37.00±6.33)°、(46.00±8.25)°( p<0.01 )。(2)移植术后30天、60天、90天试验组30秒内肘/膝关节达到自主活动最大角度的活动次数分别为2.25±0.25、5±1.89、6.43±0.81,均明显大于对照组1.25±0.16、2.0±1.89、3.43±0.20(p<0.01)。3.创面收缩率:移植术后14天、35天试验组创面收缩率为(5.67+0.48)%、(6.64±0.78)%,与对照组(5.51+0.38)%、(7.90+1.65)%相比,无明显差异(p>0.05 );移植术后70天试验组创面收缩率为(9.14+0.82)%,与对照组(11.25+1.25)%相比,有显著差别(p<0.05 )。4.组织学观察:HE染色显示试验组上皮化早于对照组,胶原纤维排列较整齐;经PCNA免疫组化证实试验组PCNA阳性细胞出现早,数目较对照组多,且主要分布于上皮细胞基底层,对照组PCNA阳性细胞散在分布。结论:1.自体脂肪颗粒及微粒皮混合移植后,创面愈合速度明显加快。2.自体脂肪颗粒及微粒皮混合移植后,能够明显提高深度烧伤创面的愈合质量,改善关节功能。