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李(P. salicina Lindl.)为蔷薇科(Roseceae)李属(Prunus L.)植物,落叶小乔木,春季开花,一般定植后3-4年开始结果,6-7年进入盛果期,是一种优良的经济树种。秭秋、秭露、秋露3个李品种系历时十年选育出来的适合湖北西部700-1500m半高山地区栽培的优良李品种。其中,秭秋是中晚熟品种(8月中旬成熟),秭露、秋露是晚熟品种(约9月中旬成熟)。本文以秭秋、秭露、秋露3个李品种为试材,应用石蜡切片、荧光显微技术等方法,对其3个品种的开花物候期、花粉质量、田间杂交授粉坐果率、花粉管萌发及授粉受精过程等开花生物学方面的内容进行系统研究;同时应用ISSR分子标记技术对包括秭秋、秭露、秋露在内的湖北三峡库区14个李品种的亲缘关系进行分析。其研究结果总结如下:1、开花物候期研究。秭秋、秭露、秋露的花期集中在3月下旬至4月上旬,秭露和秋露(晚熟品种)花期基本相同,秭秋(中熟品种)花期比两个晚熟品种晚4-7天,花期为7-10天。单花开放过程包括露瓣期、展瓣期、落瓣期三个过程。2、授粉受精研究。秭秋、秭露、秋露的新鲜花粉活力分别为79.3%、56.8%、70.5%。经柱头观察,秭归秋露李系列品种的柱头有效期为开花前2天至开花第4天,共6天,最佳授粉期为开花前2天至开花第2天,共4天。秭秋、秭露、秋露三个李品种的田间自花授粉座果率分别为8%、5.5%、6.5%,田间异花授粉座果率分别为15.5%、23.5%、18.5%。秭秋花粉在授粉后1h开始在柱头上萌发,36h后花粉管到达花柱基部,授粉后72h后双受精过程完成。3、ISSR-PCR反应体系的建立。通过正交试验,建立了李ISSR-PCR最佳反应体系:20u1反应体系中,10XBuffer(Mg2+free)2.0uL、1.5U Tap DNA聚合酶0.5umol/L的引物、0.2mmol/L的dNTPs、2.0mmol/L的MgC12、20ng模板DNA。其反应程序为:94℃预变性5min、94℃变性45sec、55-56℃退火1min、72℃延伸1.5min、38个循环,72℃延伸10min,4℃保存。4、亲缘关系分析。利用优化的ISSR-PCR反应体系,挑选出10条扩增条带特异、条带数适中、清晰、可重复性好的引物,共扩增出101条清晰且可重复的DNA条带,其中有83条属多态带,多态位点比率(Percentage of polymorphic bands, PPB)为82.18%。应用POPGENE1.31和NTSYS2.10e软件分析14个李品种的遗传距离(GD)的变化范围在0.1467-0.5072之间,遗传一致度(GI)的变化范围在0.6022-0.8601之间,遗传相似系数范围在0.65-0.89之间,平均相似系数为0.78。14个李品种可分为两组:秭秋、秭露、秋露及从美国引进的梅李女皇可聚为一组,其它湖北当地李品种亲缘关系较近,聚为第二组。