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“查干汤”又名“四味土木香散”，由土木香、苦参、悬钩子木和山柰4味药材按4∶4∶2∶1的比例组成。1977年作为首批民族用药载入《中国药典》，具有清瘟解表、使“未成熟热成熟”之功效，经辩证加味可形成60多方，用于不同瘟疫热病的治疗。其主要组方药材土木香，蒙古名“玛努”，为菊科旋覆花属植物土木香（Inula Helenium L.）的干燥根，味甘、苦、辛，性平，具有抗肿瘤、抗菌、抗炎、镇痛、驱虫和保肝等药理活性。 目的：以小鼠脾淋巴细胞生长率、细胞因子IL-2和IFN-γ的分泌为指标，考察“查干汤”对免疫功能的影响，并用拆方、提取不同极性部位、以及测定指标性成分等方法，探寻该方中免疫增强活性成分，为揭示该方治疗瘟疫热症的药效物质基础提供新的思路与方法。并通过对主药土木香抗肿瘤活性成分及作用机制进行研究，寻找土木香中新的抗肿瘤活性化合物，为传统蒙药临床合理用药提供新思路。 方法：①脾淋巴细胞增殖活性测定：用CCK-8法检测不同浓度药物对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。“查干汤”和4个组方药材土木香、苦参、悬钩子木、山柰不同极性提取物以及6个指标性成分土木香内酯、异土木香内酯、苦参碱、氧化苦参碱、肉桂酸乙酯、对甲氧基桂皮酸乙酯用于评价脾淋巴细胞增殖活性。②细胞因子测定：用ELISA法检测“查干汤”和4个组方药材土木香、苦参、悬钩子木、山柰水提物对IL-2和IFN-γ分泌的影响。③细胞毒检测：采用CCK-8法检测本课题组从土木香中分离得到的6个单体化合物对人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y、人肺癌细胞系A549、人肝癌细胞系SMMC-7721、人卵巢癌细胞系SK-OV-3、人结直肠腺癌细胞系HCT-15的体外细胞毒活性。③肿瘤靶点计算机虚拟筛选：通过Dell PowerEdge R900分子模拟服务器上传土木香中分离得到的6个单体化合物，采用AutoDock程序将其与13种临床常见肿瘤靶标进行分子对接，筛选出具有抑制肿瘤细胞生长的相关靶点。④抗肿瘤机制研究：采用Real-time PCR法检测4α,5β-环氧-1(10),11(13)-吉玛烷-12,8α-交酯（化合物1）作用人卵巢癌细胞系SK-OV-3后，PI3K-AKT-mTOR和RAS-RAF-MEK信号通路中相关基因（ERK1、ERK2、MEK1、MEK2、Raf、AKT）mRNA的表达；采用Western bolt法检测4α,5β-环氧-1(10),11(13)-吉玛烷-12,8α-交酯（化合物1）作用人卵巢癌细胞系SK-OV-3后，PI3K-AKT-mTOR和RAS-RAF-MEK信号通路中相关蛋白（phospho-ERK(1/2)、ERK(1/2)、phospho-AKT、AKT、phospho-PDK1、PDK1）的表达。 结果：①脾淋巴细胞增殖活性测定：“查干汤”及组方药材土木香、苦参、悬钩子木和山柰水提物，均能不同程度促进脾淋巴细胞增殖，而复方、组方药材醇提物及指标性成分，均无此作用。②细胞因子测定：“查干汤”和4个组方药材，均能不同程度诱导IL-2分泌；“查干汤”及其组方药材苦参、悬钩子木和山柰水提物均能不同程度诱导IFN-γ分泌。③细胞毒检测：4α,5β-环氧-1(10),11(13)-吉玛烷-12,8α-交酯（化合物1）对5种肿瘤细胞均有显著抑制作用，IC50值在6-21μM之间；Alloalantolactone（化合物2）对部分肿瘤细胞有中等抑制作用，IC50值在60-75μM之间；其余化合物对以上5种肿瘤细胞无明显抑制作用，IC50值＞100μM。③肿瘤靶点计算机虚拟筛选：通过分子对接结果可知从土木香分离得到的6个单体化合物能够抑制肿瘤细胞内的信号通路蛋白激酶BRAF和PI3K。④抗肿瘤机制研究：化合物1可显著抑制ERK1（p＜0.05）和MEK2（p＜0.05）mRNA的表达及phospho-ERK(1/2)（p＜0.05）、phospho-AKT（p＜0.01）蛋白的表达。 结论：“查干汤”及其组方药材水提物均能显著促进脾淋巴细胞增殖，并通过分泌IL-2和IFN-γ发挥免疫调节作用。土木香单体化合物4α,5β-环氧-1(10),11(13)-吉玛烷-12,8α-交酯（化合物1）能够抑制肿瘤细胞生长，并通过PI3K-AKT-mTOR和／或RAS-RAF-MEK信号通路发挥作用。