东紫苏天然活性成分的提取、纯化、分离及功效研究

来源 :昆明医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hnjylwn
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[目的]东紫苏(Elsholtiza Bodinieri Vaniot.),别名凤尾茶、牙刷草,是主要分布于云南、甘肃等地的一种唇形科、香薷属植物。在民间东紫苏可药食两用,被当地居民用于治疗风寒感冒、咽喉痛、消化不良等病症,据报道,东紫苏含有较为丰富的黄酮类化合物和精油成分,这些化学成分在抑菌、抗氧化、心血管保护等方面有着较好功效,但缺乏较为系统的研究。本文将对东紫苏总黄酮类化合物进行分离、提纯,并初步探讨其生物活性,同时对东紫苏精油的抗氧化活性进行研究。为东紫苏化学成分活性机制的深入挖掘和植物开发利用提供理论参考。[方法]采用单因素法优化东紫苏总黄酮纯化工艺;微波无溶剂法提取东紫苏精油,采用NaNO2-AL(NO3)3-NaOH法测定总黄酮的含量,色谱分离方法对黄酮化合物进行分离纯化,波谱法鉴定化合物成分。用自由基清除实验、细胞毒性实验等对东紫苏总黄酮和东紫苏精油进行抗氧化等生物活性研究。[结果]东紫苏初提物总黄酮含量为19.375 mg/g,AB-8型大孔树脂最适合用于东紫苏总黄酮的分离纯化,其静态吸附-解析最优条件为上样质量浓度1.5 mg/mL、pH 5、吸附6h,解析采用70%酸化乙醇,时间2h,纯度可由46.67%提高至81.62%;动态吸附-解析最适工艺条件为上样液流速2 mL/min、洗脱液流速1 mL/min,80mL即可洗脱,纯度提高至80.33%。抗氧化活性:0.25 mg/mL总黄酮溶液实验组较对照组β-半乳糖苷酶染色观察衰老细胞阳性率降低(P<0.01),东紫苏总黄酮和Vc对ABTS自由基清除IC50分别为0.4844 mg/mL和0.1545 mg/mL。0.5mg/mL、1mg/mL实验组SOD活性较损伤组高。抗肿瘤活性:东紫苏总黄酮对HCT116和A549生长有一定的抑制作用,IC50分别是0.8486 mg/mL和0.7708 mg/mL,表明东紫苏总黄酮是一种潜在的天然抗氧化剂并有一定的抑制肿瘤细胞增殖的作用。从东紫苏中共分离得到木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、圣草酚-7-O-β-葡萄糖苷、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷三种黄酮苷,得率分别为1.638%,1.848%和0.89%。东紫苏精油对DPPH自由基清除效果较弱,对ABTS自由基和羟自由基的清除效果较强,并可以使秀丽隐杆线虫体内过氧化氢酶CAT活性上升。[结论]东紫苏中黄酮类化合物含量丰富,且黄酮类化合物具有良好的抗氧化与抑制肿瘤细胞增殖的作用,而东紫苏精油对不同种类自由基清除能力差别较大,能提高体内过氧化氢酶CAT的活性。
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