背景:结直肠癌(colorectal cancer,CRC)作为我国发病率第三位的消化道恶性肿瘤,目前由其造成的死亡已居国内恶性肿瘤致死因素的第五位。85%的散发性CRC病例表现出染色体不稳定性,15%的CRC是由微卫星不稳定性(MSI)引起的。C8orf48(chromosome 8 open reading frame 48)定位于8p22染色体,但截止到目前,还没有关于C8orf48与CRC详细的研究。通过对TCGA数据及临床组织样本的分析,我们发现C8orf48在CRC组织的表达显著低于正常组织,并且有研究暗示其抑癌功能。故研究C8orf48的过表达和敲低后对CRC细胞增殖及迁移的影响,即在CRC细胞系验证C8orf48的功能,能够为临床上医治CRC提供新视角,为CRC的精确筛查、诊断及医治提供更有价值的方法。研究方法:1、首先,在TCGA数据库中研究C8orf48在CRC病人的肿瘤组织及正常组织样本中的表达。2、利用Q-PCR从mRNA水平分析C8orf48在CRC临床组织样本及其对应的癌旁组织样本(由西京医院提供)的表达。3、利用Western Blot确定C8orf48高表达及低表达的结直肠癌细胞系。4、C8orf48过表达载体的构建及shRNA的筛选,并用Q-PCR和Western Blot分别从mRNA水平和蛋白表达水平验证过表达及敲低的效率。5、将C8orf48过表达载体转染到LoVo细胞系中,做CCK8、克隆形成实验、transwell迁移及侵袭实验,研究C8orf48对细胞增殖及迁移的影响。6、将sh449、sh1046转染到SW480细胞系中,做CCK8、克隆形成实验、transwell迁移及侵袭实验,研究sh449、sh1046对细胞增殖及迁移的影响。结果:1、TCGA数据库中,C8orf48在CRC患者肿瘤组织中的表达明显低于正常组织样本。2、在临床样本中,C8orf48在结直肠癌临床组织样本中的表达明显低于其配对的癌旁组织样本。3、C8orf48在LoVo细胞中表达低,在SW480细胞中表达高,故后续选择LoVo作为C8orf48过表达的细胞系,SW480作为敲低C8orf48的细胞系。4、C8orf48过表达载体已成功构建,可显著降低C8orf48蛋白表达的sh449、sh1046被筛选出来。5、用LoVo细胞过表达C8orf48后C8orf48的mRNA表达升高,且明显抑制LoVo细胞的增殖及迁移侵袭能力。6、用SW480细胞系转染sh449、sh1046后,C8orf48的蛋白表达降低,且明显促进SW480细胞的增殖及迁移侵袭能力。结论:过表达C8orf48后能抑制CRC细胞的增殖与迁移能力,敲低C8orf48后能促进CRC细胞的增殖与迁移能力。这暗示了C8orf48在CRC中充当抑癌基因的角色。