番茄根系分泌物对南方根结线虫的吸引及木霉对卵孵化的促进作用

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根系分泌物在南方根结线虫侵染植物的过程中发挥着关键作用,虽然各国研究者对多种植物在不同的生长期、不同的生境中根系分泌物组成的变化及其对线虫的影响进行了大量的研究,证实根系分泌物作为信号分子被线虫感知,从而对其产生吸引行为,但是对于具体是什么代谢产物及其如何影响南方根结线虫侵染过程却鲜有明确报道。本文就6个品种的番茄根系分泌物对南方根结线虫的吸引性进行了研究,对6个番茄品种根系分泌物的吸引物质进行了鉴定,并选取部分化合物进行吸引能力验证,得到如下结论:1、对根结线虫易感番茄品种嘉宝的根系分泌物吸引根结线虫能力进行了研究。结果表明:正己烷粗提物(9.5×10-4ppm和9.5×10-5ppm)对南方根结线虫具有较强的吸引活性,吸引指数分别为0.30和0.26;萃余相粗提物在多个浓度下都检测到了吸引活性,吸引指数均达到0.20以上,其中当浓度为1 × 10-3 PPm时吸引效果最佳(吸引指数为0.28)。将萃余相粗分后进行活性检测,发现以5%:95%比例混合的甲醇:纯水得到的萃余相粗提物在多个浓度下均有较强的吸引活性,吸引指数达到了 0.25以上,其中浓度为1X 10-4 ppm时,吸引指数最高,达到了0.38。2、采用液相微萃取联合气相色谱质谱联用技术(LPME/GC-MS)对嘉宝番茄水培液的正己烷粗提物产生的挥发性化合物进行检测,一共检测到204种挥发性化合物。通过活性对比分析,选取了 11种物质进行吸引能力验证,结果表明,具有强吸引活性的化合物有四种,它们分别是芥酸(Erucic acid)、月桂醇(1-Dodecanol,2-octyl-)、1-十八烯(1-Octadecene)和 2-己基-1-癸醇(1-Decanol,2-hexyl),并且当各自浓度达到 1 ppm、7.5X 103 ppm、7X 108 ppm、8X 108 ppm 时,吸引指数分别为0.32,0.34,0.28和0.28。3、对不同品种的番茄根系对南方根结线虫的吸引能力进行了研究。发现中杂(9.5×10-4ppm)、改良毛粉(9.5×10-5ppm)、奔驰(9.5×10-1 ppm)、万农粉霸(9.5×10-6 ppm)、加州406(9.5×10-1 ppm)番茄品种的水培液正己烷粗提物吸引指数分比为为0.50、0.34、0.31、0.23、0.33。在6个检测的番茄品种中,易感品种中杂和嘉宝根系分泌物中检测到的挥发性物质最多,分别为93种和63种,普通番茄品种改良毛粉和奔驰根系分泌物中均检测到了 54种挥发性物质,抗感番茄品种加州和万农粉霸根系分泌物中检测到的物质最少,只检测到了 26种和42种挥发性物质。通过比较中杂、奔驰、改良毛粉、万农粉霸、加州这5个番茄品种水培液正己烷粗提物挥发性物质,发现在易感品种嘉宝中检测得到的四种吸引物质在5个品种中至少各含有1种。4、南方根结线虫仅能以自由活动的二龄幼虫(J2)侵染植物,然而其生活史必须经历根内寄生阶段,导致二龄幼虫(J2)不容易获得,这大大制约了实验室研究进度。本研究以南方根结线虫为对象,筛选得到一株绿色木霉菌能够快速刺激线虫卵块孵化出二龄幼虫(J2),菌株3838发酵液在加热100℃,稀释10倍的条件下制备的菌剂能够促进南方根结线虫卵块快速孵化出二龄幼虫(J2),孵化速率能够提高200%以上。论文创新点:1、证实了嘉宝番茄根系分泌物的正己烷粗提物对南方根结线虫有很强的吸引活性,在正己烷粗提物挥发性化合物中找到并鉴定了四种具有较强吸引活性的化合物。2、证实了两种抗感番茄品种、两种易感番茄品种、两种普通番茄品种根系分泌物在不同的浓度下均对南方根结线虫具有较强的吸引活性,在所有番茄品种中均至少各含有1种上述证实的四种吸引物质。3、发现了绿色木霉菌(Trichoderma viride)3838菌株制备的菌剂能够快速、高效地催化南方根结线虫卵块孵化。
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