植物MYB转录因子根据R重复序列分为四大类,MYB108属于R2R3类的MYB转录因子。本文研究的MYB108的突变体bos1是T-DNA插入突变,因为对灰霉菌特别敏感被命名为botrytis-susceptible1（bos1）。目前认为bos1的灰霉菌敏感性和机械损伤后细胞死亡的表型是因为BOS1基因的缺失造成的。T-DNA插在MYB108的5’-UTR区域,引起bos1突变体MYB108的高表达,这使得bos1突变体是隐性功能缺失突变体的结论受到怀疑。因为缺少外显子插入突变体来验证MYB108基因的功能,为此我们展开了如下探究:1.构建CRISPR敲除载体,利用CRISPR基因敲除技术和转基因技术拿到敲除成功的纯合突变体种子,命名为myb108-crispr（BOS1-Knockout）。对myb108-crispr突变体进行表型分析,灰霉菌抗性分析结果显示myb108-crispr突变体被灰霉菌滴染后不会出现类似bos1的菌斑。机械损伤后的细胞死亡表型分析结果显示myb108-crispr突变体被机械损伤后不会出现类似bos1的损伤部位周围细胞死亡现象。由此得出,myb108-crispr突变体不等于bos1突变体,MYB108不参与调节灰霉菌抗性和细胞死亡。2.为了探究bos1突变体中MYB108基因的高表达是不是其机械损伤后细胞扩散死亡的真正原因,我们首先构建了BOS1基因的过表达载体。机械损伤后,p35S::BOS1死亡细胞的扩散范围与野生型相比并没有显著差别,说明35S启动子驱动MYB108不能导致细胞死亡。我们通过对bos1突变体的重测序,发现其T-DNA上的MAS启动子序列。MAS对基因表达的启动受到机械损伤的诱导。我们构建了p MAS::BOS1转基因植株,结果显示p MAS::BOS1阳性苗经过损伤后出现细胞死亡扩散现象,说明bos1突变体的细胞死亡是MAS启动子引起的。我们通过CRISPR-cas9对bos1中的MYB108进行了敲除,结果显示:bos1中MYB108的移码突变能够消除bos1的细胞死亡表型。以上结果说明MAS启动子促进了MYB108的积累,启动了细胞死亡扩散。3.为了探究MYB108基因的功能,我们参照plant-regulomics网站上关于MYB108基因的生信分析图,选做了Na Cl处理和ABA处理,Na Cl处理结果显示MYB108单基因缺失对盐胁迫响应并没有影响,过表达植株对盐胁迫耐受力下降。ABA处理结果显示MYB108负调控ABA响应途径。转录组测序结果显示BOS1基因很可能通过ABA途径来调节细胞死亡。另外,MYB108还参与花期调控和种子育性调控,其机制尚不清楚。