病毒性脑炎患者血液和脑脊液中博尔纳病病毒p40基因片段的检测

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目的:探讨贵州省遵义地区病毒性脑炎(Virus encephalitis,VE)患者中博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)的感染情况,研究BDV p40基因的特点以及BDV p40阳性的VE患者的临床表现特点。方法:采用荧光定量逆转录聚合酶链反应(Fluorescence quantitative reverse transcriptase PCR,FQ-RT-PCR)探针法检测43例VE患者和45例外科手术患者(除外神经系统疾病及常见病毒感染性疾病)外周血淋巴细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)、脑脊液(Cerebrospinal fluid,CSF)中BDV p40基因片段,阳性产物经纯化、克隆后进行基因序列测定及分析,总结BDV p40基因片段阳性VE患者的临床特点。结果:VE患者PBMC中BDV p40基因片段阳性率为6.97%(3/43),对照组阳性率为0%(0/45),病例组阳性率高于对照组,但两组差异比较无统计学意义(P﹥0.05);VE患者CSF中BDV p40基因片段阳性率为13.9%(6/43),明显高于对照组0%(0/45),两组比较差异有统计学意义(P﹤0.05);CSF中BDV p40基因片段阳性率较PBMC中高,但两组差异无统计学意义(P﹥0.05);其中2例患者PBMC和CSF中BDV p40基因片段均为阳性;BDV p40基因片段阳性标本的PCR扩增产物经纯化、克隆及测序后与NCBI网站Gen Bank提供的BDV标准病毒株V、He/80核苷酸序列比较同源性分别为100%、98.7%,与He/80核苷酸序列比较,仅有一个核苷酸出现突变(nt609:A→G),为同义突变;BDV p40阳性VE患者发生精神行为异常的概率为71.5%(5/7),BDV p40阴性VE患者发生精神行为异常的概率为16.7%(6/36),两组比较差异有统计学意义(P﹤0.05);BDV p40阳性VE患者并发继发性癫痫的概率为28.6%(2/7),BDV p40阴性VE患者并发继发性癫痫的概率为0%(0/36),两组差异有统计学意义(P﹤0.05)。结论:遵义地区VE患者存在BDV感染,BDV感染可能与某些病因不明的病毒性脑炎有关;感染人体的BDV p40基因片段存在高度的保守性,变异性小,表明BDVp40基因片段可能是证实BDV感染的特异性标记物;BDV p40阳性的VE患者可能以精神行为异常、并发继发性癫痫为特点。
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