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目的:
1.比较正电子发射计算机断层摄影显像(PET-CT)和CT显像在判定可切除非小细胞肺癌(NSCLC)患者原发灶和纵隔淋巴结有无转移上的临床价值,评价PET-CT在可切除肺癌术前准确分期的价值。
2.荧光定量PCR检测肺癌早期诊断基因hnRNPA2/B1和LunxmRNA表达对淋巴结微转移的作用。观察hnRNPA2/B1在各组织类型肺癌中的表达,结合病理类型探讨hnRNPA2/B1与临床分期关系,以及检测hnRNPA2/B1表达用于肺癌早期诊断的可能性及其临床意义。评价LunxmRNA作为肺癌微转移肿瘤标志物的临床意义。不同肺组织中LunxmRNA表达水平是否存在差异?肺癌组织和淋巴结中LunxmRNA表达水平与肺癌临床病理生理特征的关系。
3.探讨非小细胞肺癌(NSCLC)标准摄取值(SUV)与原发灶标本组织化学染色hnRNPA2/B1表达的关系。
方法:42例可切除非小细胞肺癌患者于手术前常规进行PET-CT和CT胸部显像,测定SUV,判定肺门和纵隔淋巴结各组别有无转移。两种方法诊断的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值。2周以内行开胸手术纵隔淋巴结提取清扫以获取原发灶及纵隔淋巴结病理标本,12例非肿瘤肺叶切除作正常对照。每个淋巴结分成两半。每例标本按不同实验要求分别置液氮罐冻存至提取RNA,10%福尔马林固定和石蜡包埋。对切除的纵隔淋巴结进行常规染色,病理学检查结果与术前影像学检查比较。液氮冻存组织提取总RNA,逆转录反应(RT)获得cDNA片段,FQ-PCR通过扩增曲线及融解曲线判定结果是否为阳性,系统根据Ct值给出不同样品中和GAPDH模板cDNA相对拷贝数。通过同一标本靶基因与管家基因拷贝数比值的差异来进行实验结果的比较判断,StrategenMx3000p软件分析,最后可直接得到不同样品中目的基因的相对拷贝数进行相对定量,荧光定量PCR检测切除肿块和淋巴结的hnRNPA2/B1和LunxmRNA表达。手术获得32例肿瘤标本经常规石蜡切片,用免疫组化检测肿瘤组织hrIRNPA2/B1表达,计算肿瘤细胞hnRNP表达(即H-score评分),取肿瘤周围正常肺组织作对照。
结论:
(1)PET-CT能提高检查非小细胞肺癌纵隔淋巴结的敏感性,明显优于CT,有利于术前分期。
(2)hnRNPA2/B1和SUV可间接评价NSCLC细胞的癌变程度,hnRNPA2/B1检查敏感性、特异性高,可用于肺癌的辅助诊断的标记。
(3)NSCLC癌组织存在着hnRNPA2/B1的过度表达,与肺癌的发生、发展和转移密切相关。
(4)NSCLC癌组织中hnRNPA2/B1表达水平与淋巴结转移状态及P-TNM分期有关。
(5)LunxmRNA和hnRNPA2/B1的过度表达hnRNPA2/B1与肺癌组织类型无关。
(6)FQ-PCR扩增LunxmRNA是敏感特异地检测肺癌细胞浸润区域淋巴结的方法。淋巴结转移是术后分期的重要因子,有助于决定术后治疗策略。
(7)检测LunxmRNAhnRNPA2/B1表达有助于肺癌的早期诊断、病情预测和指导肺癌术后多学科综合治疗。故此,迫切需要检测肿瘤特异标记以助建立既具敏感性又具特异性的分子学诊断。然而,微转移不仅界定高度危险发生复发死亡的病人,也提示了肿瘤进展的生物学机制。这样一定程度上能帮助医生解释早期肺癌尽管根治性切除后仍然复发和远处转移的原因。