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脂肪累积性肌病的多向性研究：生化、病理、电生理和分子生物学分析实验目的脂肪累积性肌肉病(LipidStorageMyopathy，LSM)是由于肌肉中长链脂肪酸代谢障碍，导致大量脂肪沉积在肌纤维中而引起的一组骨骼肌疾病。肌纤维中脂肪堆积是本病最显著的病理改变特点。其病因相当复杂，近几年生化研究己发现多种生化缺陷可导致LSM。但在不同原因导致的LSM中，原发性或继发性肉碱缺乏被认为是LSM最常见的病因。近年研究发现肉碱转运体OCTN2基因突变是原发性肉碱缺乏的病因，该类疾病给予肉碱治疗非常有效，早期诊断可以有效地预防疾病的发展。但是，我国目前尚缺乏对LSM病因的有效诊断方法。因此本研究的目的是(1)建立用高效液相色谱的方法检测血浆左旋肉碱含量，以用于临床诊断及科学研究。(2)对血浆左旋肉碱降低的LSM病人进行OCTN2基因突变的检测，以探讨我国LSM病人中有无OCTN2基因突变现象。(3)回顾性研究LSM病人的肌电图及肌肉病理改变之间的关系以提高该病的临床诊断水平并对病因分析提供帮助。
研究方法1.应用高效液相色谱建立血浆左旋肉碱的检测方法，并对其进行精密度、稳定性、回收率的测定。同时测定80例正常人血浆左旋肉碱的含量及12例LSM病人血浆左旋肉碱的含量。
2.对6例血浆左旋肉碱含量降低的LSM病人的外周血白细胞进行DNA提取，对OCTN2基因的10个外显子全部进行PCR扩增并直接测序，以寻找OCTN2基因突变。
3.回顾性研究33例LSM病人的临床表现、肌电图检查结果及肌肉病理改变特点，以总结LSM的肌肉病理与肌电图改变之间的关系，为提高LSM的临床诊断水平及探讨LSM的病因提供帮助。结果1.高效液相色谱法测定血浆左旋肉碱含量的方法可靠，其精密度、稳定性、回收率均达到临床检验标准，可用于临床诊断及科学研究。
2.正常人血浆左旋肉碱含量男性高于女性。男性平均50±9.4uM，女性平均38±7.6uM。
3.12例病理确诊的LSM病人中，6例血浆左旋肉碱含量正常，6例血浆左旋肉碱含量减低。
4.对6例血浆左旋肉碱含量降低的LSM病人OCTN2基因突变的检测，首次发现2例在1号内含子和1号外显子同时出现相同的1个纯合突变、1个杂合突变。2例在9号内含子出现相同的杂合突变。1例在1号外显子出现3个可疑杂合突变。
5.肌电图改变以肌源性改变为主，可合并或单独出现神经源性改变甚至为正常的肌电图结果。肌肉病理改变有两种情况，一种为单纯脂肪累积性肌肉病，一种为线粒体-脂肪累积性肌肉病。后者的脂肪滴沉积程度更显著以及更多的患者出现小角状肌纤维萎缩，更易导致骨骼肌的电生理改变以及合并周围神经损害。
结论1.高效液相色谱法是检测血浆左旋肉碱含量的可靠、有效的方法。适用于临床诊断及研究。
2.我国部分LSM病人中存在OCTN2基因突变。OCTN2基因突变可能是我国LSM病人血浆肉碱缺乏的原因之一。
3.线粒体—脂肪累积性肌肉病者更易导致骨骼肌的电生理改变以及合并周围神经损害。