目的:建立一种新型的从血清中高效、快速提取外泌体的方法,并验证血清中外泌体的分子与细胞学生物活性。方法:由于血清样本中含有大量的低密度脂蛋白,利用低密度脂蛋白受体（LDLR）与低密度脂蛋白（LDL）结合的原理去除血清中的低密度脂蛋白干扰,再利用外泌体表面磷脂分子基团与部分氧化物双配位结合的原理,使用Zr O2浓缩富集外泌体并提高下游分析的灵敏度。将该方法与“金标准”--超高速离心法（UC）、聚乙二醇沉淀法（PEG）进行比较。使用纳米流式细胞仪（Nano FCM）、透射电子显微镜（TEM）来检测外泌体的粒径分布情况、颗粒数浓度和形态特征,使用免疫蛋白印迹（WB）的方法鉴定外泌体表面标志性蛋白。对外泌体内部特异性微小核糖核酸（miRNAs）成分进行分析,构建miRNAs文库（miRNA-seq）并采用Agilent生物分析仪对miRNAs片段进行质控,再进行基因通路分析。采用实时荧光定量PCR方法（q RT-PCR）对miRNAs指标进行相对定量分析。结果:构建了LDLR重力柱纯化血清外泌体,再使用Zr O2颗粒富集纯化后的血清,将这种提取血清外泌体的方法称为NSPE法。NSPE法对1 m L血清的LDL去除率为99.5%,外泌体的回收率为86.9%。提取的外泌体保持完整的圆盘形状,含有CD81+、TSG101+和其他阳性表面蛋白。在此过程中,颗粒浓度为（2.94±0.3）×1010particle/m L,粒径为88.07±2.94 nm。最后,我们应用该方法检验了外泌体内部包含的T-Tau蛋白可区分阿尔茨海默病患者和健康对照者的可行性,结果显示成功率显著高（P＜0.001）,以及在阿尔茨海默症和对照组的血清外泌体检验已在脑脊液外泌体中被验证的miRNAs生物标志物。结论:NSPE法可以在60分钟内有效地提取体积为200-1000μL的血清的外泌体,且无需复杂的设备。与UC等基于试剂盒的提取方法相比,NSPE分离的外泌体具有更高的完整性和纯度。总之,我们使用新建立的NSPE方法为分离高质量的血清和其他体液源性外泌体提供了基础,该方法可快速有效提取外泌体,与部分提取方法进行比较具有操作时间短、提取效率高的优势,从而更好的在临床环境中进行液体活检诊断。