霍山石斛快速繁殖及其次生代谢物含量的调控研究

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本文对霍山石斛的离体快繁进行系统的研究,并且对霍山石斛次生代谢物调控进行分析研究,结果如下:1、选取MS、6-BA、KT、NAA这四个因子,每个因子3个水平,通过正交设计试验对霍山石斛丛生芽的诱导进行研究,研究结果发现:这4个因子对霍山石斛丛生芽诱导的影响顺序依次为:KT>基本培养基>6-BA>NAA,其中,KT对霍山石斛丛生芽的诱导极为显著,而基本培养基、NAA、6-BA对霍山石斛丛生芽的诱导不显著。并从中筛选出诱导霍山石斛丛生芽的最优培养基为: 1/2MS+0.2mg/LKT+0.2mg/LNAA+0.3mg/L6-BA。2、以1/2MS+0.2mg/LKT+0.2mg/LNAA+0.3mg/L6-BA为基本培养基作为对照,通过附加浓度100g/L、200g/L、300g/L的土豆泥、香蕉泥、白萝卜汁和10mg/L、20mg/L、40mg/L的硝酸镧进行培养。研究结果发现:不同添加物对霍山石斛生长均具有一定的促进作用,其中土豆泥和硝酸镧的促进作用具有显著差异性。同时,对各生理指标进行相关分析发现,可以把叶绿素含量作为霍山石斛优质苗木早期选择的一个重要生理指标。3、以MS为基本培养基作为对照,通过添加浓度为0.4mg/L、0.8mg/L、1.6mg/L的IBA,浓度为0.5mg/L、1.0mg/L、2.0mg/L的NAA以及质量分数为10%、20%、40%的香蕉泥进行生根培养,发现:添加20%的香蕉泥诱导霍山石斛试管苗生根效果最好。4、以1/2MS+0.2mg/LKT+0.2mg/LNAA+0.3mg/L6-BA为基本培养基作为对照,添加浓度为0.5mg/L、2.5mg/L、12.5mg/L的L-赖氨酸、0.2mg/L、1.0mg/L、5.0mg/L的水杨酸以及10mg/L、20mg/L、40mg/L的硝酸镧进行石斛多糖的调控研究,发现:20mg/L的硝酸镧和2.5mg/L的L-赖氨酸在各自浓度范围内促进石斛多糖含量的提升效果最好,且具有极显著差异性;水杨酸则具有显著差异性。同时,对石斛多糖清除有机自由基DPPH的能力进行初步研究,发现石斛多糖具有清除有机自有基的能力。5、以1/2MS+0.2mg/LKT+0.2mg/LNAA+0.3mg/L6-BA为基本培养基作为对照,添加浓度为0.5mg/L、2.5mg/L、12.5mg/L的L-赖氨酸、0.2mg/L、1.0mg/L、5.0mg/L的水杨酸以及10mg/L、20mg/L、40mg/L的硝酸镧进行石斛碱和联苄类物质Moscatilin的调控研究,利用HPLC/UV法对其进行含量测定,发现:L-赖氨酸和水杨酸对Moscatilin的含量均有一定的促进作用,且12.5mg/L的L-赖氨酸和0.5mg/L的水杨酸在各自浓度范围的影响提升效果最好。
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