FOXM1在急性白血病细胞中表达的检测及其与二甲双胍抗肿瘤作用的关系

来源 :华中科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:onlysimon
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
【目的】研究肿瘤基因FOXM1在初治急性白血病患者中的表达情况,并分析其与患者预后的相关性;用硼替佐米处理白血病细胞系Jurkat和ML-2,检测其FOXM1表达改变;用硫链丝菌素处理ML-2细胞,检测FOXM1和mTOR表达改变,及其相关性;研究二甲双胍对ML-2细胞凋亡、细胞周期、增殖等生物学行为的影响。【方法】1.从初治的急性白血病患者骨髓中提取单个核细胞总RNA,逆转录得cDNA后,通过RT-PCR检测FOXM1的mRNA水平表达情况。通过查阅患者实验室检查资料,获取患者初诊时血常规、骨髓细胞学、染色体和基因检测结果,统计分析得出FOXM1是否表达与患者各项预后指标间有无关联,从而证实FOXM1能否成为一项有意义的预后指标;2.用硼替佐米处理Jurkat和ML-2细胞48h后,用RQ-PCR方法检测FOXM1mRNA水平表达情况;用FOXM1特异性抑制剂硫链丝菌素作用Jurkat细胞16h后,用RQ-PCR方法检测FOXM1和mTOR的mRNA水平表达改变,并检测二者变化有无关联;3.用二甲双胍处理ML-2细胞,用RQ-PCR方法检测FOXM1的mRNA水平表达,用WB方法检测蛋白水平表达的改变;4.二甲双胍处理ML-2细胞后,于24h和48h分别用Annexin V-PI双染法,通过流式细胞术检测细胞凋亡情况;用PI染色检测细胞周期改变;用CFSE标记染色,检测细胞增殖能力改变。【结果】1.通过对71例标本的检测发现FOXM1mRNA水平在初治的急性白血病患者中呈高表达,总阳性率为85.92%,但其是否表达与患者外周血白细胞计数、骨髓中幼稚细胞比例、遗传学预后等级等预后相关因素无明显相关性;2.硼替佐米处理ML-2和Jurkat细胞48h后,FOXM1mRNA水平在两个细胞系中都呈剂量依赖性下调,硫链丝菌素作用于Jurkat细胞16h后,FOXM1mRNA水平也呈剂量依赖性下调,同时mTOR的mRNA水平也随之下调,二者变化趋势一致,有相关性;3.二甲双胍处理ML-2细胞48h后,FOXM1mRNA水平显著下调,但并不呈剂量依赖性,低药物浓度下调作用更明显,FOXM1的蛋白水平表达对二甲双胍呈剂量依赖性下调;4.二甲双胍处理ML-2细胞24h和48h后,2μmol和8μmol组对细胞凋亡率有明显上调作用;二甲双胍作用于ML-2细胞24h后,2μmol和8μmol浓度组对细胞周期有明显阻断作用,将ML-2细胞明显阻断于G0/G1期,导致S期数量下降,对S期向G2/M期进展无明显影响,但对G2/M期进展到G0/G1期有阻滞作用;二甲双胍作用48h后,2μmol和4μmol组ML-2细胞的增殖作用明显下调,对肿瘤细胞的生长有显著抑制作用。【结论】FOXM1在初诊的急性白血病患者中呈高表达,硼替佐米对ML-2和Jurkat细胞的FOXM1表达有下调作用;硫链丝菌素下调FOXM1表达后,mTOR的表达也随之下降,二者有明显相关性;FOXM1可能成为抗肿瘤治疗的靶点。二甲双胍对ML-2细胞FOXM1的mRNA水平和蛋白水平表达都有下调作用;二甲双胍对ML-2细胞的凋亡有促进作用,将细胞周期阻断于G0/G1期和G2/M期,影响周期进展,对细胞增殖能力有下调作用,可能成为有前景的抗白血病药物。
其他文献
“粉丝”这个词从《超级女声》的PK中诞生以来,各种属于“粉丝”一类的新词源源不断地被制造出来,各式各样的人加入粉丝团队中去,形成了一种“粉丝文化”。这种文化兴起的原
目的:本实验构建含人烯醇化1(ENO1)目的基因的重组逆转录病毒载体,为下一步研究ENO1在肿瘤中作用和与宫颈癌细胞化疗之间的相关性做好准备。方法:从液氮中复苏人宫颈癌细胞,用D
目的研究乙型肝炎患者的血清中干扰素(IFN-α)抗体的检出率及其意义.方法将研究对象分为正常对照组,急、慢性乙肝及肝炎肝硬化组,用酶联免疫测定法检测各组的血清IEN抗体阳性
2015年7月底至8月初,笔者随中国青年媒体工作者代表团访问日本。此次访问活动时值抗战胜利70周年前夕,也是中日自2012年“购岛”风波之后正式重启的民间访日重要活动之一。代表
在“重农抑商”的政策下,徽商却能够异军突起,成为明清十大商帮的领军人物。历史学界和经济史学界都对徽商缘何兴起的原因进行深入的研究,拟从法律社会史学的视角,对徽商崛起
改革开放三十多年来,我国已经基本实现了产品市场的市场化进程,但包括劳动力、资本及各种中间品等要素市场的市场化进程一直很缓慢,全国各地区均存在较严重的要素市场扭曲现
目的利用人体骨盆标本制作骶髂关节骨折脱位模型,研究垂直不稳定性骨盆骨折中骶髂复合体生物力学损伤特点。方法成年男性冰冻骨盆标本6具,固定于MTS生物材料试验机上以2m/s速
量子点又称半导体纳米晶体,它可发出激发荧光,具有荧光强度高、稳定性好和发射光谱可调等特性,是同时检测多种信号的理想材料。这些独特性质使其更广泛的应用于分子生物学领
在面对高职院校价值观教育存在的问题中,为了增强学生对社会主义核心价值观的认识,在思想政治教学中渗透了社会主义核心价值观的内容,满足高职院校学生成长的必要性。所以在