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目的:miR-21在参与细胞中多种过程,通过抑制靶基因的表达来影响肿瘤的发生发展。在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中,它的作用机制仍不清楚,尚无关于miR-21和DLBCL细胞表型之间关系的报道。本实验旨在研究ABC-型DLBCL中能否通过miR-21对PDCD4及PTEN两种基因的调控来影响肿瘤的增殖、侵袭能力和凋亡。探讨以miR-21作为靶分子,对DLBCL基因治疗的可能性。研究方法:1)采用QRT-PCR比较ABC-type及GCB-type中miR-21的表达水平;2)采用荧光素酶报告实验直接证明PDCD4及PTEN是miR-21靶基因;3)转染OCI-LY3及OCI-LY10后,运用QRT-PCR检测OCI-LY3及OCI-LY10miR-21含量的改变;4)采用QRT-PCR法和Western blot法分别检测转染细胞中PDCD4和PTEN mRNA和蛋白表达的变化;5)采用MTT法检测转染后OCI-LY3、OCI-LY10细胞增殖水平的变化;6)采用Transwell法检测转染后对OCI-LY3、OCI-LY10细胞的体外侵袭能力的影响;7)采用流式细胞术检测转染后对OCI-LY3、OCI-LY10细胞的凋亡的影响;结果:1)QRT-PCR结果表明ABC-型DLBCL中miR-21的表达明显高与GCB-型DLBCL;2)荧光素酶报告实验证明了PDCD4及PTEN是miR-21靶基因;3)QRT-PCR法和Western blot法显示转染后随着细胞中miR-21的量的减少,PDCD4和PTEN的蛋白表达明显降低,但PDCD4和PTEN的nRNA的量变化不明显;4)MTT结果显示,在转染24h、48h、72h和96h后,OCI-LY3/anti-miR-21细胞在48h、72h和96h的增殖能力较OCI-LY3/inhibitor control分别下降至87%(P<0.01),85%(P<0.01),77%(P<0.01);OCI-LY10/anti-miR-21细胞在48h、72h和96h的增殖能力较OCI-LY10/inhibitor control分别下降至71%(P<0.01),73%(P<0.01),67%(P<0.01);5)细胞体外侵袭力测定结果显示:OCI-LY3/anti-miR-21及OCI-LY10/anti-miR-21组中穿膜细胞的数目分别是OCI-LY3/inhibitor control及OCI-LY10/inhibitorcontrol组的71%(P<0.05)和60%(P<0.05)6)流式细胞术显示:OCI-LY3/anti-miR-21及OCI-LY10/anti-miR-21组细胞的凋亡显著高于OCI-LY3/inhibitor control及OCI-LY10/inhibitor control组。结论:RNA沉默技术特异性降低OCI-LY3和OCI-LY10细胞miR-21表达后,细胞增殖、侵袭能力受到明显抑制,凋亡增加,说明miR-21能促进OCI-LY3和OCI-LY10细胞的生长。说明miR-21与DLBCL的进展相关,可能为一种新的DLBCL治疗靶分子。