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玉米赤酶醇来自于玉米,花生,小麦,大米等产生的玉米赤霉醇菌在不规范的储存时产生的次生代谢产物为玉米赤霉烯酮的还原产物,商品名字“畜大壮”又名“右环十四酮酚”,这种还原产物属于雷索酸内酯类非甾体类同化激素的物质,有较强的促进生长的作用。玉米赤酶醇是一种效果比较好的促进动物生长的激素类物质,属于非固醇非激素类化合物于一类的物质。玉米赤霉醇具有促进蛋白质合成和提高蛋白质效率的作用所以在欧美等发达国家被广泛使用,我国也是在二十世纪末期开始在中国示范。后来经过大量的实验工作和数据,证明玉米赤霉醇在哺乳动物体内有蓄积,并且对动物和人都具有一定的危害性。所以发达国家就明确禁止将玉米赤霉醇等激素类药物用于养殖我国农业部在第193号公告明确规定玉米赤霉醇于等对人体有害的抗生素类药物也禁用于所有食源性动物,同时还规定了在可食动物的组织和尿液中不得检出。而目前的检测方法主要有液相,质谱和串联质谱等方法,但是这些方法都比较繁琐,时间比较长,对操作人员技术要求非常高,所以酶联免疫的方法更容易被大众接收,因为玉米赤霉醇酶联免疫的方法比较简单,实用性比较强,特异性较好,对操作人员的技术要求不高。更容易被基层的检测部门接受,一般的饲料公司等也能使用。1.目的:建立快速、有效比较经济的玉米赤霉醇检测试剂盒用于检测植物性食品中ZER的残留量。2.方法:应用间接竞争ELISA法,这种方法是采用抗原与抗体的特异反应的原理,将需要检测物质和酶通过生物的方法连接就起来,最后通过酶与底物产生颜色的不同来定量测定看待检测的物质的含量。测定的对象可以是抗体也可以是抗原建立玉米赤霉醇单克隆抗体快速检测植物性食品中ZER含量的定性或者是半定量检测。同时对该ELISA试剂盒进行了包被,固定,吹干等一系列的调试,使得玉米赤霉醇试剂盒的反应更加灵敏,特异性更强。3.结果:实验以人工合成的ZER为包被原,ZER为竞争半抗原,两者与一定量的抗玉米赤霉醇单克隆抗体反应,建立检测ZER的ELISA方法。当包被浓度为1:5000时是最理想的包被浓度比例,当单抗和酶标二抗稀释倍数调节到1:500和1:2500时,试剂盒的显色效果最为理想。然而当样品溶液与单抗溶液体积比50:50时酶联效果最为理想,底物溶液的选择中等浓度底物显色液,单抗反应时间的确定60min,抗体最适工作浓度为1:5000,酶标二抗的最适工作浓度为1:5000。而当所研制的试剂盒检测限控制在0.5ng/mL时,添加回收率在60.0%-120.0%之间,变异系数小于20%,在2-8℃条件下可保存3个月。