基因工程菌Streptomyces avermitilis TM24次级代谢产物分离鉴定及杀虫杀螨活性研究

来源 :浙江农林大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:Vercetti
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聚酮类化合物是自然界中一类重要的具有生物活性和结构多样性的化合物。该类化合物由酰基辅酶A前体经聚酮合成酶(PKSs)生物合成。利用组合生物合成技术形成杂交PKSs被认为是开发新型聚酮化合物的一种很好的途径。本文对基因工程菌株Streptomyces avermitilis TM24的活性成分进行了初步研究,包括S.avermitilis TM24代谢产物的分离鉴定,以及所得化合物的杀螨和杀虫活性测定。1、基因工程菌株S.avermitilis TM24次级代谢产物的分离与鉴定。将30L基因工程菌株S.avermitilis TM24发酵液过滤、菌体经乙醇萃取、浓缩得到258 g浸膏。浸膏经硅胶柱层析(100-200目)、凝胶柱层析(Sephadex LH-20)、高效液相色谱法(C-18和C-3柱)等分离纯化得到12个化合物。利用核磁共振、高分辨质谱、红外、紫外等波谱分析方法对其进行结构鉴定,鉴定结果表明其中两个分别为天维菌素A和天维菌素B,其余10个为新化合物,命名为Tenvermectin F(1),Tenvermectin G(2),Tenvermectin H(3),Tenvermectin I(4),Tenvermectin K(5),Tenvermectin L(6),Tenvermectin Monosaccharide A(7),Tenvermectin Monosaccharide B(8),Tenvermectin Monosaccharide C(9),Tenvermectin Monosaccharide D(10)。2、化合物杀虫杀螨活性测定。以朱砂叶螨、松材线虫和小菜蛾为供试生物,测定化合物的杀虫和杀螨活性。天维菌素A、天维菌素B、米尔贝A4、化合物1-8对朱砂叶螨的致死中浓LC50为0.0043、0.0049、0.0210、0.0022、0.0172、0.0248、0.0297、0.0723、0.0193、0.0266、0.0776 mg/L,化合物9和10的LC50大于0.2000 mg/L;天维菌素A、天维菌素B、米尔贝A4、化合物1-9对松材线虫24 h的致死中浓LC50分别为3.45、2.17、4.04、28.60、17.11、12.23、19.92、4.56、38.56、4.30、20.19、8.34mg/L,化合物10的LC50大于100 mg/L;化合物1-10对小菜蛾的生物活性较低。3、比较化合物的杀虫杀螨活性和分子结构,天维菌素类化合物C-5、C-13、C-24、C-25位连接不同的基团对杀虫活性影响较大,天维菌素类化合物C-27位呋喃环缺失后杀虫活性降低。论文研究结果为基因工程菌开发提供了一定的理论基础和科学依据。
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