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目的探讨黄芪甲苷(astragasolide IV,ASIV)对氧糖剥夺复氧(oxygen glucose deprivation reperfusion,OGD/R)后星形胶质细胞上肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)与水通道蛋白-4(aquaporin-4,AQP-4)表达的影响。方法选用第二代第一天的星形胶质细胞。将星形胶质细胞以每孔2.5万的浓度接种到96孔板,分别用0.01、0.1、1、10、100ng·mL-1的TNF-α和0.001、0.01、0.1μmol·mL-1黄芪甲苷进行干预。用CCK-8试剂盒检测星形胶质细胞活性的变化。将星形胶质细胞分别用0.5、5、10、30、50ng·mL-1的TNF-α进行干预,用RT-PCR方法检测AQP-4基因表达水平的变化。将星形胶质细胞分为sham组、TNF-α干预组、0.001μmol·mL-1ASIV+TNF-α干预组、0.01μmol·mL-1ASIV+TNF-α干预组、0.1μmol·mL-1ASIV+TNF-α干预组,用RT-PCR方法检测AQP-4基因表达水平的变化。将星形胶质细胞放入缺氧培养箱(1%O2、94%N2、5%CO2),分别干预1、2、3、4h,复氧24h后用RT-PCR和Western Blot检测AQP-4和TNF-α的表达情况。将星形胶质细胞分为control组、OGD/R组、OGD/R+0.001μmol·mL-1ASIV组、OGD/R+0.01μmol·mL-1ASIV组,用RT-PCR和免疫荧光检测AQP-4和TNF-α的表达情况。结果当TNF-α的浓度为0~100ng·mL-1时对星形胶质细胞无毒性作用可以用于后续实验;所选浓度的黄芪甲苷均可提高星形胶质细胞活性,无毒性作用,可以用于后续实验;与control组相比,各个TNF-α干预组的AQP-4基因表达水平均升高,并且具有统计学意义(P<0.05),但是10ng·mL-1 TNF-α干预组诱导AQP-4基因表达的作用最为明显;0.001、0.01、0.1μmol·mL-1黄芪甲苷+TNF-α三个干预组的AQP-4基因表达水平与TNF-α干预组相比明显降低(P<0.05),但是仍高于sham组;与control组相比,AQP-4基因在缺氧1h和2h时表达无显著变化,在缺氧3h时,表达达到高峰(P<0.05),在缺氧4h时,表达有所减弱但是仍高于control组(P<0.05);与control组相比,氧糖剥夺1、2、3、4h组的AQP-4蛋白表达水平均升高(P<0.05),并且氧糖剥夺后AQP-4蛋白表达水平的高峰出现在氧糖剥夺3h时(P<0.05);与control组相比,TNF-α基因在缺氧1h时,表达达到高峰(P<0.05),在缺氧2h时表达有所减弱但是仍高于control组(P<0.05)。在缺氧3h和4h时,与control组相比,表达无明显变化;与control组相比,氧糖剥夺1、2、3、4h组的TNF-a蛋白表达水平均升高(P<0.05),并且氧糖剥夺后TNF-a蛋白表达水平的高峰出现在氧糖剥夺1h时(P<0.05);OGD3h+0.001μmol·mL-1ASIV组和OGD3h+0.01μmol·mL-1ASIV组的AQP-4基因表达水平较OGD3h组相比明显降低(P<0.05),但是前者仍高于control组(P<0.05),后者低于control组(P<0.05);与control组相比,缺氧3h组的AQP-4蛋白表达水平明显升高(P<0.05),与缺氧3h组相比,缺氧3h+0.001μmol/mlASI组的AQP-4蛋白表达水平明显降低(P<0.05);OGD1h+0.001μmol·mL-1 ASIV组和OGD1h+0.01μmol·mL-1ASIV组的TNF-α基因表达水平与OGD1h组相比明显降低(P<0.05)并且仍高于control组(P<0.05);与control组相比,缺氧1h组的TNF-α蛋白表达水平明显升高(P<0.05),与缺氧1h组相比,缺氧1h+0.001μmol/ml ASIV组的TNF-α蛋白表达水平明显降低。结论1、黄芪甲苷可以明显下调由TNF-α所致的星形胶质细胞上AQP-4基因表达水平的升高;2、氧糖剥夺复氧模型可以诱导星形胶质细胞上AQP-4和TNF-α的表达,并且TNF-α的表达先于AQP-4的表达;3、黄芪甲苷干预可以下调氧糖剥夺复氧后AQP-4和TNF-α的表达,并且黄芪甲苷可能是通过下调TNF-α的表达来影响AQP-4的表达继而抑制细胞水肿的。