绿色荧光蛋白体外转染体内示踪异体骨髓基质干细胞的研究

来源 :内蒙古医学院 内蒙古医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:czp168
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:观察经质粒为载体,脂质体介导的绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)转染的骨髓间充质干细胞体外表达及体内示踪情况,观察两组骨髓间充质干细胞肌肉内植入的存活和炎性反应等情况,为骨髓间充质干细胞的异体移植提供实验依据。 方法:以质粒病毒为载体,PT67细胞为包装细胞,介导绿色荧光蛋白转染新西兰大白兔的骨髓基质干细胞,在相差显微镜和荧光显微镜下观察,流式细胞仪检测GFP的表达效率,G418培养液筛选转染细胞,常规培养。在体外培养的第二代骨髓基质干细胞中加入含BMP-2的诱导培养基分别在培养2周后,与未转染的同期成骨细胞对照,在相差显微镜和荧光显微镜下观察,流式细胞仪检测GFP的表达效率,对比转染组与对照组细胞细胞含量及生长曲线情况,并将转染后的细胞分别植人新西兰大白兔和日本大耳白兔背部肌肉内,在第3d、1w、3w、5w作活检,利用激光共聚焦显微镜、透射电镜及光学显微镜观察异体BMSCs存活情况及周围炎性细胞浸润等组织学变化。 结果:1、骨髓基质干细胞体外培养后贴壁、集落生长,细胞呈梭形、多角形,有多个大小不一的突起,胞浆淡蓝色,含有较大的颗粒,核卵圆形,细胞分裂相多见,连续传代培养生长良好。细胞生长曲线示细胞生长状态良好。培养2周后骨髓基质干细胞表面CD44抗原表达阳性。2、BM-SCs经质粒病毒感染后,植入宿主后24时,冰冻切片后荧光显微镜下即可检测到有绿色荧光表达,72h表达最强,随着时间推移绿色荧光蛋白阳性细胞均逐渐减少,到5周时仍可见少量表达。3、术后自体组、异体组移植组动物切口均未出现明显的红肿及分泌物,无异常死亡。初期HE染色可见自体、异体组细胞炎性反应均明显,有较多炎性细胞浸润,以白细胞为主,随时间推移植入区炎性反应不明显。 结论:1、异体骨髓基质干细胞容易获取、来源充足、可以大量扩增,加入诱导液后细胞形态发生改变并向成骨细胞分化,可作为骨组织工程的种子细胞。2、GFP基因的导人不会影响骨髓间充质干细胞的活性和生物学特性,可应用于活体细胞的实时检测。3、BMSC在同种异体组织内可以存活5周且免疫排斥反应不明显,从而提示异体BMSCs可能具有应用价值。
其他文献
请下载后查看,本文暂不支持在线获取查看简介。 Please download to view, this article does not support online access to view profile.
《幼儿园教育指导纲要(试行)》明确指出:幼儿园必须树立正确的健康观念,在重视幼儿身体健康的同时,要高度重视幼儿的心理健康。由于家庭矛盾、父母角色缺失、幼儿园、社会教育不当等问题。幼儿出现了大量心理健康问题,有些孩子已经偏离正常发展的轨道,影响了身心健康成长。幼儿心理健康已得到教师、家长乃至社会各界的广泛关注。幼儿时期是心理健康教育的黄金时期。在幼儿园里,当孩子们不假思索的涂涂画画时,那些作品正是一
K优402是我市新引进的早杂组合。去年在我市进行了试种,表现出产量高、抗性好、米质较优等特点。因此,今年安排了一部分面积的试制。为了摸清K优402双亲的开花习性,提高制种
探讨超声造影检查评价大剂量阿托伐他汀(40mg/d)治疗6个月后颈动脉粥样硬化斑块的内新生血管的改变;对阿托伐他汀稳定颈动脉斑块的机制做初步讨论。选择2007年1月-2008年10月
校园文化建设是学校教育必不可缺的组成部位,它体现一个学校价值的所在,表现校园精神样貌。校园文化是以学生为主体,校园为主要空间,涵盖校园领导、教职工在内,以课外文化活动为主
摘 要 在小学语文教学法多元化的基础上,教师通过对趣味教学法、故事教学法、情感教学法、鼓励教学法、情境教学法、问题教学法、案例教学法、生活化教学法、合作学习教学法、讨论式教学法以及项目教学法等多个教学法比较分析,找出各教学法的相同点和不同点,并明确其偏重点,旨在为教师选择合适的语文教学法开展教学作参考,以全面提高学生的语文能力。  关键词 小学语文;教学法;比较研究  中图分类号:G622 文献标
在登上第十一届中国新闻奖、第二届中国新闻名专栏奖领奖台的时候,有朋友问我:“此刻,你是什么心情?”我和获奖的朋友们如实地告诉大家:对我们获奖者来说,此刻,是一个令人心情激动的
《小王子》读后感:飞翔是一种奇妙的感觉。驾驶着飞机航行在翻腾的云海上,有时眼前会闪过太阳的金光。俯视地上万物,都成比例地缩小,一切看来难以逾越的高峰此时都在臣伏于脚下。写作也是一种奇妙的感觉。拿着笔俯身在白纸前,思想的火花偶尔一闪,那是你要赶紧抓住的灵感。在写作中,你俯视人性,纷纭世事都化为你的笔下文字。我想,《小王子》的作者圣-艾克苏佩里之所以一生中迷恋这两件事,是因为这两件事都有挑战自我的意味
一、该实验在教材中所处的地位与作用  细胞膜是细胞至关重要的组成结构。细胞膜的功能非常多,控制物质进出是其中之一。七年级上册的教材中简单介绍了细胞膜在这方面的作用。由于细胞膜非常薄,肉眼无法直接观察到,因此讲述时往往一笔带过或者单纯让学生记忆。为加深学生对细胞膜此功能的理解,特设计了本实验。  二、实验器材  鸡蛋五个、清水、红墨水、硫酸铜溶液、紫色石蕊试液、培养皿一个、烧杯五个  三、实验原理 
期刊