PTPRO是受体型酪氨酸磷酸酯酶家族的一员,其功能主要涉及神经组织中轴突的生长和导向,以及肿瘤抑制。PTPRO的表达具有组织特异性,在哺乳动物中PTPRO主要表达于不同发育时期的肾脏组织和神经组织,而在很多肿瘤细胞中则通过DNA甲基化沉默。有文献报道,PTPRO在机体发育和脑的成熟中发挥重要作用,例如在肾脏中,PTPRO表达于发育早期的肾小球细胞顶部和发育成熟的肾小球足细胞顶部;在脑中,PTPRO基因最高表达出现于妊娠中后期,这一时期也是脑部轴突发生的主要时期。已有研究证明,受体型酪氨酸磷酸酯酶家族(RPTPs)成员在调节果蝇神经系统发育过程中起主要作用。在脊椎动物中,许多受体型酪氨酸磷酸酯酶家族(RPTPs)成员例如:typeⅡa RPTPs,typeⅢRPTP已经在轴突生长过程中发挥重要作用,但是PTPRO参与轴突生长的具体机制以及表达调控机制却报道很少。本论文旨在研究PTPRO基因在NGF诱导PC12轴突分化过程中表达升高的转录调控机制。通过反转录PCR(RT-PCR)、real-time RCR和Western blotinging检测我们发现,NGF诱导PC12轴突分化后,PTPRO基因表达发生了明显的上调。细胞转染和荧光素酶报告基因分析结果显示,外源过表达转录因子E2F1能显著提高PTPRO启动子荧光素酶报告基因的活性。real-time RCR和western bloting结果表明,转录因子E2F1提高了细胞内源PTPTO基因的mRNA和蛋白表达水平。点突变实验确定了PTPRO启动子上E2F1的结合位点。而ChIP实验表明E2F1能够结合在PTPRO的启动子上。通过以上实验,我们初步地研究了PC12细胞在NGF刺激后PTPRO表达上调的调控机制。为下一步更详细的研究PTPRO在神经分化过程中的具体分子机制以及PTPRO基因调控的具体机制定了基础。