蛋白激发子SsSm1在油菜菌核病菌生长发育及致病过程中作用机制研究

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死体营养型寄生物核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum(Lib.)de Bary)是重要植物病原菌,该菌寄主广泛,可以侵染包括多种重要作物在内的四百多种植物,并造成严重的病害。核盘菌寄生于油菜引起的菌核病对油菜生产造成极大的危害,常常导致极大的经济损失。植物在长期的进化过程中,发展出一套依赖自身细胞的先天免疫和侵染部位的系统信号来应对外界的病原物侵害的免疫系统。在病原物与寄主植物的相互作用之间会产生多种信号分子,而激发子则是其中非常重要的一类物质。激发子的种类多样,包括多糖、糖蛋白、多肽等。本实验室在核盘菌基因组中发现一个与木霉菌激发子Sm1编码序列具有高度同源性的蛋白质,命名为SsSm1。本研究克隆了核盘菌蛋白激发子同源物SsSm1的编码基因全长序列,构建了SsSm1的异源表达载体和植物二元表达载体,分别在大肠杆菌细胞和本氏烟叶片上进行表达。接下来,使用RNA干扰来探究SsSm1在核盘菌生长发育过程中的作用机制。主要结果如下:(1)异源表达的重组蛋白处理本氏烟叶片能够引起过敏反应类似的坏死斑,使用农杆菌介导的目的基因在本氏烟叶片上的瞬时表达也引起过敏性坏死;(2)SsSm1沉默菌株的菌丝生长呈现出明显滞后和分枝异常,转化子的侵染垫形成受到抑制,产生量显著减少,且菌核形成畸形;(3)SsSm1沉默菌株对NaCl,山梨醇和SDS尤为敏感;(4)油菜和大豆离体叶片检测其致病力发现SsSm1沉默菌株的致病能力明显降低。上述结果表明,SsSm1可能主要参与了核盘菌的菌丝和侵染垫的发育,但具体的分子机制需要进一步研究。本论文的开展有助于解析核盘菌蛋白激发子SsSm1的功能,为核盘菌的防治提供理论基础。
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