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富硒酵母是一种应用广泛的食品添加剂,是一种重要的人体有机硒补充剂,它来源于外源无机硒在生长过程中转化有机硒的酵母菌体,筛选出高水平将无机硒转化为有机硒的酵母菌株对富硒酵母的生产和应用具有重要意义。硒蛋白是富硒酵母中有机硒存在的一种主要形式,其含量不仅是衡量富硒酵母质量的重要指标,并且反映了酵母可以将无机硒转化为有机硒的能力。研究表明,硒代磷酸是硒蛋白合成的活性硒供体,由硒磷酸合酶（SPS）催化生成,该酶是硒蛋白合成的限速酶。鉴于SPS活性对H2O2的不耐受性,本论文将以H2O2为选择压力进行富硒酵母菌株的诱变筛选,并对诱变菌株的富硒培养条件进行分析。取得的主要研究结果如下:（1）以酿酒酵母为起始菌株,叠氮化钠为诱变剂,H2O2为选择压力,经诱变、初筛、复筛,获得两株富硒水平高的菌株HXS-01和HXS-02。菌株HXS-01和HXS-02,经过48 h摇瓶富硒培养后,它们的总硒和产率分别比出发菌株高3.4?3.7倍和2.9?3.2倍,有机硒含量及产率分别比出发菌株高3.7?4.0倍和3.1?3.5倍,且以菌株HXS-02的富硒能力更高,其总硒含量和产率分别为2303.97μg/g和7 945.19μg/L,有机硒占总硒的百分比超过97%。（2）富硒菌株具有稳定的高富硒能力、高SPS活性和高硒蛋白含量。菌株HXS-01和HXS-02经连续6次传代后它们的总硒含量、有机硒含量、总硒产率、有机硒产率为出发菌株的3.9?5.2倍,表现出稳定的的富富硒和高转化有机硒的能力,且它们的硒磷酸合成酶活性和蛋白硒含量均显著高于出发菌株,SPS活性是出发菌株的1.7?2.1倍,菌体蛋白硒含量分别是出发菌株的1.9倍和2.1倍。（3）初步确定了富硒菌株的富硒条件。在培养温度为28℃、转速为180r/min、接种量为10%、装液量为50 m L/250m L的条件下,亚硒酸钠的最佳添加时间和浓度为8 h和62.5μg/m L,最佳富硒培养时间为24 h;果糖、还原性谷胱甘肽、还原型辅酶Ⅱ对菌株HXS-02的总硒含量及产率、有机硒硒含量及产率有促进作用,三者适合的浓度分别是6 g/L、26 mmol/L和0.20 mmol/L。综上所述,以H2O2为选择压力可以有效筛选出富集有机硒能力高的酵母菌株,获得的富硒菌株在适宜的培养条件下可以高水平将无机硒转化为有机硒。SPS活性分析和硒蛋白含量测定表明,耐H2O2的菌株具有高的SPS活性,而高SPS活性的菌株可能赋予了菌株具有高水平富集、转化无机硒为有机硒的能力。