【摘 要】
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本研究应用核酸杂交法,以鲤鱼白细胞介素-1βcDNA部分片段为探针,筛选丝裂原刺激的鲤鱼外周血白细胞cDNA文库,克隆了白细胞介素-1β全长cDNA序列,测得全长序列为1213bp,包含8
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本研究应用核酸杂交法,以鲤鱼白细胞介素-1βcDNA部分片段为探针,筛选丝裂原刺激的鲤鱼外周血白细胞cDNA文库,克隆了白细胞介素-1β全长cDNA序列,测得全长序列为1213bp,包含831bp的开放阅读框,推测编码276个氨基酸:根据所获得的全长cDNA序列设计引物,以鲤鱼脾脏基因组DNA为模板,克隆了白细胞介素-1β基因组DNA,序列全长为2451bp,其中含有6个内含子和7个外显子,并且外显子和内含子剪接位点都符合GT-AG规则;荧光定量PCR分析鲤鱼正常白细胞和有丝分裂原刺激的白细胞中,白细胞介素-1β基因不同时间段以及不同刺激物作用后的转录差异,实验结果表明:有丝分裂原刺激的白细胞中白细胞介素-1β转录增强,特别是LPS、PHA联合刺激后转录增强极显著,但是随着时间的延长转录增强的幅度呈下降趋势,可见白细胞介素-1β的转录对不同的诱导物敏感度不同,推测白细胞受刺激早期发挥免疫作用。
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