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目的:利用血清药理学方法,探讨白芍总苷(TGP)对柯萨奇B3病毒(CVB3)感染大鼠原代心肌细胞有无保护和干预作用,为该药在临床治疗病毒性心肌炎的应用提供理论依据。方法:本研究分成三个部分。第一部分是SD大鼠原代心肌细胞培养。取出生1-3d SD乳鼠15只,无菌取其心室肌用0.25%胰蛋白酶消化后制成心肌单细胞悬液,移入培养瓶进行培养。第二部分是各组含药血清的制备。取30只6-8周龄SD大鼠,随机分为6组,每组5只,分别为TGP低剂量组(50mg/kg.d)、TGP中剂量组(100mg/kg.d)、TGP高剂量组(200mg/kg.d)、干扰素组、双黄连组(60mg/kg.d)、正常血清组。干扰素组腹腔注射干扰素5×105U 1次/d/只,正常血清组不给任何药物。余组按各组剂量灌胃, 2次/d,连续3d。末次给药1h后心脏采血10ml制成六组含药血清。并采用倍比稀释法测定含药血清对心肌细胞的毒性,根据细胞病变(CPE)结果设定含药血清终浓度为20%。第三部分是含药血清对CVB3感染大鼠原代心肌细胞的干预。取长成单层乳鼠心肌细胞,分成8组:①细胞对照组,②病毒对照组,③TGP低剂量组,④TGP中剂量组,⑤TGP高剂量组,⑥干扰素组,⑦双黄连组,⑧正常血清组。各孔单层细胞中,除细胞对照组外,余组均按0.1ml/孔量加入含100TCID50CVB3的维持液。同时各组加入对应含药血清0.1ml/孔,置37℃5%CO2培养箱中培养,待病毒对照组CPE出现++++时,停止培养,取各组细胞上清液用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)、肌酸磷酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH),置光镜下观察细胞形态学变化,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测细胞存活率。结果:(1)TGP高剂量组、干扰素组及双黄连组细胞存活率分别为(90±9)%、(85±10)%、(85±9)%。病毒对照组细胞存活率为(43±6)%,其均数比较P﹤0.05。而TGP低、中剂量组及正常血清组细胞存活率分别为(45±3)%、(48±6)%、(42±7)%,与病毒对照组相比无显著性差异(P >0.05)。(2)干预24h后TGP高剂量组、干扰素组及双黄连组细胞上清液中LDH、CK、cTnI均明显低于病毒对照组(P﹤0.05)。而TGP低、中剂量组及正常血清组与病毒对照组相比无显著性差异(P > 0.05)。结论:TGP高剂量组可减轻心肌细胞病变,减少cTnI、CK、LDH的释放,拮抗病毒感染心肌的炎性反应,对CVB3感染大鼠原代心肌细胞有保护作用。