微流控芯片上白细胞全自动分选和γ-H2AX染色研究

来源 :大连海事大学 | 被引量 : 6次 | 上传用户:binhuchen007
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空间辐射对生物机体损伤的研究已成为人类探索空间环境的一个重要方面,开展空间辐射对人体造成损伤的现场快速评估技术具有重要的意义和研究价值。目前,检测辐射损伤的生物标志物主要有染色体畸变、微核以及γ-H2AX等,检测γ-H2AX的主要方法有免疫荧光检测法和流式细胞术等。与传统的分析方法相比,微流控芯片具有分析效率高、试剂及样品消耗量极少以及系统体积小、易于集成化等优点,是一种微型化、集成化的技术平台,受到广大研究者的关注。本文旨在结合免疫荧光检测法和流式细胞术的优点,设计微流控芯片,实现γ-H2AX的快速检测。本文的主要研究内容包括以下几个方面:(1)利用UVC辐射全血,使用流式细胞术研究淋巴细胞γ-H2AX的表达,确定辐射剂量-效应关系。(2)基于RPS电阻脉冲原理,设计了微流控芯片,实现了全自动检测和分选人外周血中一定数量的白细胞。(3)改进了对人脐静脉内皮细胞(HUVEC-C) γ-H2AX免疫荧光染色方法,在微流控芯片上首次实现了细胞γ-H2AX免疫荧光染色以及对荧光信号的全自动检测。本文为早期快速检测及评估辐射损伤提供一种新方法,对于发展微流控芯片上γ-H2AX全自动检测技术,以及研发便携式装置用于在轨开展空间科学实验具有一定的研究意义。
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