【摘 要】
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目的:探讨伏隔核（the nucleus accumbens,NAc）γ-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid,GABA）神经元通过调控下丘脑外侧区（Lateral Hypothalamus,LHA）食欲素-A（orexin-A）表达对普通饮食（normal diet,ND）大鼠和高脂饮食致肥胖（diet-induced obesity,DIO）大鼠摄取可口食物量的影响。方法:普通饮食
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目的:探讨伏隔核（the nucleus accumbens,NAc）γ-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid,GABA）神经元通过调控下丘脑外侧区（Lateral Hypothalamus,LHA）食欲素-A（orexin-A）表达对普通饮食（normal diet,ND）大鼠和高脂饮食致肥胖（diet-induced obesity,DIO）大鼠摄取可口食物量的影响。方法:普通饮食组和高脂饮食组大鼠,每周测量体重。8w后随机选取6只ND大鼠和6只DIO大鼠,观察饱食后30min内ND大鼠和DIO大鼠可口食物摄取量的差异。采用荧光金逆行追踪及免疫荧光化学法观察NAc内的GABA神经元到下丘脑LHA神经元的神经投射;观察LHA神经元orexin-A、nesfatin-1表达及LHA内orexin-A和GABA-A受体共表达;观察DIO大鼠NAc-LHA间GABA能通路变化。采用单细胞外放电方法,观察微量注射GABA及电刺激NAc对ND大鼠和DIO大鼠LHA内胃扩张（GD）敏感性神经元放电活动的作用,并观察GABA-A受体阻断剂荷包牡丹碱（Bicuculline,BIC）对该作用的影响。通过LHA核团微量注射GABA-A受体激动剂蝇蕈醇（Muscimol,MUS）或GABA-A受体阻断剂BIC、电刺激NAc,观察NAc内GABA能信号在下丘脑LHA对ND大鼠和DIO大鼠享乐性摄食的影响,并观察阻断orexin-A信号后可口食物摄入量的变化。结果:1.DIO大鼠可口食物摄取量比ND大鼠显著增多（P＜0.05）。2.可口食物摄入后DIO大鼠与ND大鼠LHA内nesfatin-1表达均显著增加（P＜0.05）,ND大鼠LHA内orexin-A显著减少（P＜0.05）而DIO大鼠orexin-A表达无显著改变（P＞0.05）3.荧光金逆行追踪结合荧光免疫组化方法结果显示,DIO大鼠NAc内FG与GABA共存神经元数量显著低于ND大鼠（P＜0.05）,而ND大鼠和DIO大鼠LHA内orexin-A和GABA-A受体双标记的免疫阳性神经元数量则无显著性差异（P＞0.05）。4.LHA内GABA对胃牵张敏感性神经元（Gastric distension,GD）放电活动的影响结果显示,通过微电极给予GABA可显著降低ND和DIO大鼠LHA内大部分胃扩张兴奋性神经元（gastric distension excited neurons,GD-E）和胃扩张抑制性神经元（gastric distension inhibited neurons,GD-I）的放电频率（P＜0.05）,且在DIO大鼠LHA内微量注射GABA对GD神经元的抑制效应比ND大鼠更为显著（P＜0.05）;LHA预先微量注射GABA-A受体拮抗剂BIC后再给予GABA,可部分阻断GABA的抑制作用（P＜0.05）。电刺激NAc可使大鼠LHA内GD-E和GD-I神经元放电频率明显增加（P＜0.05）,LHA预先给予BIC,则电刺激NAc对ND大鼠GD敏感性神经元的作用进一步增加（P＜0.05）,而LHA预先注射BIC后电刺激NAc对DIO大鼠GD神经元的兴奋效应无显著改变（P＞0.05）。5.LHA核团微量注射MUS可使ND和DIO大鼠可口食物摄取量显著减少（P＜0.05）,注射BIC可使ND大鼠可口食物摄取量显著增加（P＜0.05）,而DIO大鼠可口食物摄取量没有显著变化（P＞0.05）。电刺激NAc后,ND大鼠可口食物摄入量显著减少（P＜0.05）,而预先在LHA微量注射BIC,电刺激NAc对ND大鼠可口食物摄入的抑制作用明显减弱（P＜0.05）。电刺激DIO大鼠NAc,可口食物摄入量显著减少（P＜0.05）,而预先在LHA微量注射BIC,再电刺激NAc,DIO大鼠可口食物摄入量与LHA微量注射NS组相比无显著性差异（P＞0.05）。6.侧脑室注射orexin-A阻断剂SB334867,可使ND大鼠和DIO大鼠享乐性摄食显著减少（P＜0.05）,而侧脑室注射SB334867后再LHA注射BIC,ND大鼠和DIO大鼠可口食物摄取量变化与侧脑室注射SB334867后再LHA注射NS组相比没有显著性差异（P＞0.05）。结论:伏隔核GABA能信号可调节下丘脑外侧区神经元orexin-A表达,影响饱食后可口食物摄入量。肥胖大鼠NAc与下丘脑LHA间GABA能神经通路信号减弱,摄取可口食物后orexin-A仍保持较高水平,发挥促进肥胖大鼠摄食作用。激活LHA内GABA受体或脑室注射orexin-A受体拮抗剂均可有效降低DIO大鼠可口食物摄入量。
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