陕西桃小食心虫抗药性监测及解毒酶活力分析

来源 :西北农林科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bitao6633620
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桃小食心虫Carposina sasakii Matsumura是最重要的果实食心虫之一,在我国的主要水果产区均有其分布,给我国的果树产业造成了严重的经济损失。果实套袋结合化学农药喷施是目前防治桃小食心虫的主要措施。长期大量地使用化学杀虫剂容易导致害虫产生抗药性。本研究对陕四个地区的桃小食心虫田间种群进行抗药性监测,明确了陕西四个苹果主产区桃小食心虫的抗药性水平,分析了田间种群三大解毒酶活力水平,利用转录组初步鉴定了桃小食心虫三大解毒酶基因,在实验室用高效氯氟氰菊酯对桃小食心虫进行连续3代处理并分析处理后对桃小食心虫解毒酶活力及关键解毒基因的表达水平。主要结果如下:1、采取浸果法和药膜法两种生物测定方法,分别测定了高效氯氟氰菊酯、毒死蜱、阿维菌素、氯虫苯甲酰胺对桃小食心虫敏感品系的毒力。通过比较两种生测方法的优缺点,发现浸果法操作简单且生测结果稳定性更好。浸果法结果表明,毒死蜱对桃小食心虫的毒力最高,其LC50为0.9655 mg/L,阿维菌素毒力最低,其LC50为5.3980mg/L。2、采用浸果法对陕西四个主要苹果产区兴平、白水、旬邑和凤翔的桃小食心虫田间种群进行了抗药性监测,明确了这四个地区桃小食心虫种群对四种果园常用杀虫剂的抗性水平。与敏感品系相比,这四个地区桃小食心虫田间种群对高效氯氟氰菊酯、毒死蜱、阿维菌、氯虫苯甲酰胺仍处于敏感或敏感性下降阶段。分析各杀虫剂LC50间的相关性,发现高效氯氟氰菊酯和氯虫苯甲酰胺之间存在显著的正相关性,和毒死蜱、阿维菌素之间不存在显著相关性。毒死蜱与阿维菌素、氯虫苯甲酰胺之间,以及阿维菌素和氯虫苯甲酰胺之间均不存在显著相关性。3、测定桃小食心虫四个田间种群和敏感品系的细胞色素P450酶、谷胱甘肽S-转移酶、羧酸酯酶活性,发现四个田间种群的细胞色素P450酶活性和谷胱甘肽S-转移酶活性均显著高于敏感品系,其中白水地区桃小食心虫P450酶活性最高,凤翔地区桃小食心虫P450酶活性最低,为敏感品系的1.50倍。田间种群羧酸酯酶活性显著低于敏感品系。用三种亚致死浓度的高效氯氟氰菊酯对桃小食心虫进行连续3代处理后,P450酶活性显著增高;LC50浓度高效氯氟氰菊酯处理后GST活力显著提高;亚致死浓度的高效氯氟氰菊酯处理后羧酸酯酶活性有所升高,但升高不显著。4、经LC20、LC35、LC50三种不同亚致死浓度的高效氯氟氰菊酯连续处理3代后,桃小食心虫卵期和幼虫期延长,其中LC50处理组桃小食心虫卵期延长0.62天,幼虫期延长了1.74天;LC35和LC50浓度处理后其卵期和幼虫期均显著延长,成虫寿命显著缩短,产卵量显著下降,老熟幼虫脱果率及结茧率显著下降,雌雄性比显著下降。5、通过对桃小食心虫转录组数据进行分析,鉴定了该虫共有167个解毒酶基因序列,其中细胞色素P450基因97个,谷胱甘肽S-转移酶基因34个,36个羧酸酯酶基因。利用q RT-PCR定量检测LC50的高效氯氟氰菊酯处理3代后的桃小食心虫解毒酶基因表达量变化,发现CYP6AB14、CYP6B5、CYP6B46、P4506B2、P4506B7等5个P450基因显著上调,较对照组分别上调2.10倍、11.49倍、3.04倍、2.71倍、2.60倍;GSTomega1、GSTE14-like、GSTepsilon3、GSTsigma1等4个GST基因显著上调。综上所述,陕西省四个桃小食心虫地理种群的抗药性水平不同,桃小食心虫代谢酶活力发生变化,亚致死剂量的高效氯氟氰菊酯影响桃小食心虫的生长发育和繁殖,LC50的高效氯氟氰菊酯处理导致几个P450和GST基因表达水平显著上调。本论文研究结果为桃小食心虫的抗药性治理提供了科学依据,对生产实践中合理用药具有一定指导意义。
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