【摘 要】
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金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,简称金葡菌）引发食物中毒事件的屡屡发生让科研工作者开始逐步对其展开研究。据了解金葡菌能在动物皮肤、纺织品以及医疗器械表面粘附生存引发多种感染性疾病,也能在食品加工设备表面长期潜伏,从而引发食物中毒。目前金葡菌的致病机理研究一直是研究热门,然而其耐受逆境的机制研究却存在空缺。绝大多细菌都难以在干燥环境中生存,因此食品生产加工过程经常采用干燥
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金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,简称金葡菌）引发食物中毒事件的屡屡发生让科研工作者开始逐步对其展开研究。据了解金葡菌能在动物皮肤、纺织品以及医疗器械表面粘附生存引发多种感染性疾病,也能在食品加工设备表面长期潜伏,从而引发食物中毒。目前金葡菌的致病机理研究一直是研究热门,然而其耐受逆境的机制研究却存在空缺。绝大多细菌都难以在干燥环境中生存,因此食品生产加工过程经常采用干燥处理来控制食品中微生物含量。金葡菌作为重要的食品源致病微生物,其中与干燥耐受相关基因的研究报道较少。我们以此为切入点,以从生牛乳中筛选分离的金葡菌RMSA24为材料挖掘乳源金葡菌干燥耐受相关基因。本实验利用转座质粒pBTn构建RMSA24的转座子突变体库,库中含3154株突变体。建立干燥胁迫模型,以筛选干燥压力下表型发生显著变化的突变体菌株。再利用随机引物PCR和测序比对等方法定位筛选所得菌株的突变基因。最终获得8个可能与干燥耐受相关的基因。此外,我们对筛选的突变体生物被膜形成能力进行检测,再以RT-q PCR的方法对干燥胁迫前后的野生型RMSA24内这8个基因转录水平进行分析。发现xfw-2377、xfw-2233和xfw-1640在干燥压力下转录水平显著提升。xfw-2377、xfw-2130和cod Y可通过调控生物被膜形成以增强菌株干燥耐受性。本实验构建的突变体库对乳源金葡菌基因功能探索提供了材料支撑。此外定位的8个基因与干燥耐受相关,这些基因的发现可为乳制品加工过程中金葡菌防治提供新的策略。
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