FPS-ZM1及NGF对戊四氮致痫幼鼠脑保护的研究

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目的研究戊四氮致痫幼鼠痫性发作后海马和血清中HMGB1和TRX的变化,并用RAGE受体抑制剂FPS-ZM1及神经营养因子mNGF进行干预,观察上述两种药物对HMGB1和TRX表达的影响,以探讨癫痫发作后脑组织损伤情况以及FPS-ZM1、mNGF的神经保护作用,为临床干预、预防和改善癫痫发作带来的脑损伤提供理论基础,以期为癫痫的临床医治提供新的方向。方法将130只清洁级Wistar雄性大鼠幼崽(3-4周龄,体重50-60g),随机分为A组(正常对照组)、B组(癫痫模型组)、C组(mNGF组)、D组(FPS-ZM1组),A组31只,其余三组每组33只,幼鼠腹腔注射40mg/kg戊四氮以建立慢性点燃癫痫模型,造模成功后A及B组予等剂量生理盐水、C组予mNGF 2000AU/kg、D组予FPS-ZM1 1mg/kg腹腔注射连续1周干预,每次给药结束后观察其行为学表现30min。干预完成后3h、24h、72h戊巴比妥腹腔注射麻醉,取躯干血后断头分离出海马。采用Western-blot方法测定海马HMGB1的表达水平,ELISA法检测血清HMGB1及血清、海马中TRX的表达量。结果1.幼鼠行为学表现:正常对照组幼鼠注射生理盐水后活动自如,无惊厥行为出现,各癫痫组幼鼠在注射PTZ后先后出现不同等级水平的惊厥发作,随着建模时间的延长其发作等级逐步增高,最终达到慢性点燃标准。幼鼠在实验开始之前自由进食、活动,一般情况可。2.癫痫模型组海马区HMGB1表达水平在各个时间段均明显高于正常对照组,其差异在统计学上具有显著性意义(P=0.00);FPS-ZM1组及mNGF组HMGB1表达水平在各时段均低于癫痫模型组,具有显著性差异(P<0.05);FPS-ZM1组HMGB1表达水平在3h、24h较mNGF组下降是更为明显的,差异具有统计学意义(P<0.05),72h两者之间的差异无统计学意义(P>0.05)。血清中HMGB1蛋白表达量亦得到相似结果。3.癫痫模型组海马区各时段TRX含量低于正常对照组,差异具备统计学意义(P<0.01);FPS-ZM1组及mNGF组TRX含量在各时段均高于癫痫模型组,但低于正常对照组,具有统计学差异(P<0.05);FPS-ZM1组和mNGF组两组各时段TRX含量差别均无统计学意义(P>0.05);血清中TRX亦见相似结果。结论1.癫痫幼鼠HMGB1蛋白表达升高,TRX含量降低,表明免疫炎症反应、氧化应激参与癫痫的发生进程。2.血清HMGB1、TRX可能成为反映癫痫后脑损伤的生化指标。3.FPS-ZM1及mNGF可能通过降低癫痫幼鼠早期炎症反应及氧化应激损伤,从而起到脑保护的作用。
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