地塞米松和维生素B12干预下小鼠腭胚突Shh相关信号因子的研究

来源 :遵义医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shinboy_zsl
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目的:  地塞米松及其拮抗剂维生素B12干预妊娠关键期孕鼠后,利用Western blot技术分析小鼠腭胚突Shh信号通路重要因子、细胞周期调控因子以及初级纤毛解聚相关因子的变化,探讨外界因素干预下Shh通路相关信号因子、细胞周期调节因子和纤毛解聚相关因子变化之间的关系。  方法:  将C67BL/6J孕鼠随机分为空白对照组、维生素B12组、地塞米松组、维生素B12+地塞米松组。在孕鼠妊娠10~12天分别每天进行腹腔注射一定剂量生理盐水、维生素B12、地塞米松、维生素B12+地塞米松,在孕鼠妊娠13.5天取出胎鼠,体式显微镜下分离双侧腭板组织,并提取蛋白样品。利用Western blot技术分别检测各组样品中Shh信号通路关键因子Smo、Ptch1、细胞周期调节因子Cyclin D1、初级纤毛解聚相关因子Aurora A的含量变化后进行统计学分析。  结果:  Smo表达含量在各组中两两相比,无统计学差异。Ptch1在地塞米松组中表达较其余三组显著下调(P<0.01);维生素B12+地塞米松组分别和空白对照组及维生素B12组相比较,其Ptch1表达明显减少(P<0.01),但仍高于地塞米松组(P<0.01);而空白对照组和维生素B12组对比无明显差异。Aurora A在地塞米松组中表达含量与其他三组相比显著下降(P<0.01);而维生素B12+地塞米松组分别与空白对照组及维生素B12组相比,Aurora A表达亦有减少(P<0.05),但仍高于地塞米松组(P<0.01);空白对照组和维生素B12组相比无明显差异。Cyclin D1在地塞米松组中表达含量与其他三组相比显著下降(P<0.01);空白对照组分别和维生素B12组、维生素B12+地塞米松组相比,Cyclin D1含量无明显变化;维生素B12组中Cyclin D1含量较维生素B12+地塞米松组稍高(P<0.05)。  结论:  DEX抑制小鼠腭胚突细胞增殖可能是通过抑制腭胚突中Aurora A和Cyclin D1的表达,以及影响Shh下游信号传递完成。VB12可通过上调相关因子蛋白含量拮抗这一抑制效果,但不能使Aurora A和Ptch1上调至正常水平,但二者如何具体相互作用、共同影响Shh信号通路中Ptch1和Smo的调控仍需进一步研究。
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