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本研究以绵羊为试验动物，通过体内和体外试验，对硼砂作为反刍动物瘤胃脲酶抑制剂进行了全面系统研究，并与现在生产中应用的反刍动物瘤胃微生物脲酶抑制剂乙酰氧肟酸(AHA)进行了对比。体外试验比较了几种脲酶抑制剂对脲酶的抑制作用。体内试验主要研究了脲酶抑制剂对瘤胃环境、瘤胃发酵、营养物质消化率及氮代谢的影响，并初步探讨了绵羊对脲酶抑制剂的适应性。试验羊体重平均40.3±1.2kg，手术安装瘤胃瘘管。采用4×4拉丁方设计或完全随机分组设计，预试期为10-15天。 1．在脲酶抑制剂浓度为0.0001mol／L、0.001mol／L、0.01mol／L和0.1mol／L时，对大豆脲酶的抑制作用不同，AHA为6％、6.2％、9.66％和29.79％，氢醌(HQ)为8.4％、13.03％、19.79％和44.75％，邻苯二酚(CAT)为20.34％、19.12％、83.16％和93.78％，而硼砂为16.55％、17.18％、18.95％和35.50％。在高浓度时，CAT对大豆脲酶的抑制作用明显增强。在脲酶抑制剂浓度为0.0001mol／L、0.001mol／L、0.01mol／L和0.1mol／L时，AHA、HQ、CAT和硼砂对绵羊瘤胃微生物脲酶活性的抑制作用不同，AHA为9.58％、14.04％、41.30％和72.73％，HQ为12.21％、39.99％、64.62％和78.87％，CAT为6.07％、9.36％、31.29％和50.44％，而硼砂分别为4.97％、8.63％、21.78％和32.02％。表明大豆脲酶和瘤胃微生物脲酶在结构上是有区别。 向绵羊瘤胃灌注脲酶抑制剂可减缓瘤胃氨的释放，硼砂的作用效果不如HQ或AHA。这与体外试验的结果是一致的。按重量计算，达按按到相近作用效果时，硼砂与AHA或HQ的比例约为30-40:1。按比价计算，硼砂与AHA相当。 2．硼砂对细菌和原虫总数未产生影响。硼砂组A(1g硼砂／kg日粮)、硼砂组B(2g硼砂／kg日粮)和AHA组(25mg／kg日粮)的血液生化指标差异不显著(p＞0.05)。硼砂组A、硼砂组B、AHA组的蛋白水解酶活性分别比对照提高108.2％、200.39％和173.8％，其中硼砂组B差异达到显著水平(p＜0.05)。与对照相比，添加脲酶抑制剂各组，脲酶活性略有降低，纤维素酶、总脱氢酶和淀粉酶活性略有升高，但均未达到显著水平(p＞0.05)。说明饲喂硼砂对绵羊是安全的，不会对绵羊瘤胃产生不利影响。 3．采食后1小时，硼砂组A、硼砂组B和AHA组，氨的释放分别被降低了4.3％、14.55％和13.82％(p＞0.05)。对于0-8小时间瘤胃平均氨浓度而言，硼砂组A、硼砂组B和AHA组瘤胃氨分别被降低了0.46％、5.8％和6.8％(p＞0.05)。以采食后1小时为例，硼砂组A、硼砂组B和AHA组瘤胃尿素浓度分别比对照组提高24.2％、42.5％和13.7％(p＞0.05)。在0-8小时期间，硼砂组A、硼砂组B和AHA组瘤胃平均尿素浓度分别比对照组提高了31.8％、31.22％和22.99％(p＞0.05)。表明饲喂脲酶抑制剂使瘤胃尿素浓度长时间维持在较高水平。不同处理组间的瘤胃pH值差异不显著。绵羊采食后2小时，硼砂组A的乙酸和总挥发性脂肪酸含量显著高于其它各组，丙酸含量只是显著高于AHA组(P＜0.05)。其它时间点各处理的各项指标差异不显著(p＞0.05)。0-10小时期间，添加脲酶抑制剂组乙酸、丙酸、丁酸、总挥发性脂肪酸及乙酸／丙酸比例均较对照 东北农业大学农学博士学位论文一组略有提高（p＞0刀5）。 4．培养24小时，硼砂组A、硼砂组B和AHA组的干物质降解率分别比对照组提高了0．68％、12．3％和门．1％（Pd．05）；培养48小时，＊HA组比对照组提高12％（p＜0刀5）。在6－48小时试验期内，添加晚酶抑制剂对蛋白质降解率未产生影响。培养6小时，硼砂组B和＊HA组的＊＊F降解率显著高于对照组（p＜0刀5）：在其它培养时间点，各处理组也较对照组高，但差异不显著你对5）。培养24小时，硼砂组B和AHA组NDF维降解率分别较对照提高了8．8％和NjZ％（卜0．05）；培养4吕小时，AHA组ND下降解率较对照组提高7．58％（p＜0刀5）。饲喂脱酶抑制剂没有改变饲粮外流速度。表明，在一定程度上腺酶抑制剂改善了瘤胃环境。 5．饲喂服酶抑制对日粮干物质消化率、有机物消化率、蛋白质消化率、ADF消化率及NDF消化率未产生影响，对绵羊的采食量没有影响。硼砂组A、硼砂组B和AHA组绵羊瘤胃尿素氮分别较对照组提高20．9％、22．7％和ZI．5％（P＞0刀5）。添加豚酶抑制剂对尿中尿素、血浆尿素氮、尿素库、尿素容积未产生影响。晚酶抑制剂对绵羊尿氮、粪氮和氮存留率均未产生影响。硼砂组A的微生物氮日合成量高于其它各组（p＜o刀5）。可能与硼的生理作用有关。 6．氨和尿素水平：在停饲后2小时、24小时、50小时和72小时，硼砂组较对照组服酶活性分别降低了49．6o、49．35％、10．6％和。5．38o。停止饲喂硼砂后24内服酶活性变化较小，50小时明显升高。瘤胃氨浓度和尿素浓度的变化趋势与眼酶活性一致，氨的浓度分别降低33．l％、30．7O、14．03O和19．06％，尿素浓度分别降低了31．8o、34．39％、19．53％和 13．54％。表明，绵羊瘤胃对硼砂吸收很少。 硼砂组十二指肠晚酶活性低于对照组，而回肠脱酶活性高于对照组。硼砂组回肠氨浓度高于对照组。可能是硼元素刺激了空肠后?