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背景与目的子痫前期(preeclampsia,PE)是妊娠期高血压疾病的一种,是妊娠期常见而特有的疾病。该病严重影响母婴健康,是孕产妇和围生儿死亡的重要原因。20世纪80年代,国外学者首次提出,根据本病的发病时间可分为早发型子痫前期(early onset preeclampsia)和晚发型子痫前期(late onset preeclampsia)。目前,国外报导早发型子痫前期占妊娠高血压疾病的20.4%,而在我国流行病学研究发现为11.09%。且在城市,孕产妇的死亡率达18.9/10万。关于子痫前期发病机制的假说很多,近年来,测定孕妇外周血中游离核酸也成为探讨其病因及发病机理的热点之一。Michael等人首先在恶性黑色素瘤患者外周血中检测到游离mRNA,随后Poon等人首次在孕育男胎的孕妇血浆中发现Y染色体特异性锌指蛋白mRNA,并证实了孕妇外周血中存在胎儿游离mRNA。Ng等人在孕妇外周血中发现了促肾上腺激素释放激素(CRH) mRNA,肿瘤转移抑制基因(KISS-1) mRNA和选择素P(selectin-P)mRNA等,并证明它们是胎盘特异性表达的。KISS-1与妊娠滋养细胞在子宫内膜的浸润有关,是一种新的肿瘤转移抑制基因。CRH可通过激活NO/cGMP(一氧化氮/环磷酸鸟苷)通路控制胎儿-胎盘血循环,从而影响胎盘血管的生物学效应。selectin-P属于细胞粘附分子家族,介导白细胞滚动过程中与内皮细胞的粘附,致内皮细胞功能紊乱。本研究通过实时荧光定量PCR方法,分别对晚发型重度子痫前期、早发型重度子痫前期、正常妊娠孕4周>34周、正常妊娠孕周≤34周孕妇外周血中的胎儿游离KISS-1mRNA, CRHmRNA和selectin-PmRNA的表达进行相对定量,分析它们与子痫前期的相关性。探讨胎儿游离：RNA在子痫前期早期筛查中的价值。材料与方法1.研究对象：选2010年7月——2011年9月在郑州大学第二附属医院和郑州大学第三附属医院妇产科门诊及住院部的患者共105例,分为正常对照组和重度子痫前期组,具体如下：(1)重度子痫前期组：共65例,分为两组。早发型重度子痫前期组患者30例；晚发型重度子痫前期组患者35例。(2)正常对照组：共40例,分为两组,早发型对照组孕周≤34周的正常孕妇20例；晚发型对照组孕周>34周的正常孕妇20例。研究对象的筛选标准：既往体健,单胎妊娠,无其他内外科合并症及并发症,未临产,符合重度子痫前期的诊断标准,均以剖宫产终止妊娠。诊断标准参考乐杰主编人民卫生出版社出版《妇产科学》第7版。分组标准参考文献[’][2]。2.研究方法(1)提取血浆游离mRNA,反转录为cDNA,采用实时荧光定量PCR方法检测各组标本中目的基因的表达量。(2)用相对定量公式法对目标基因进行相对定量。RQ=2-ΔΔCt(3)实验数据使用SPSS17.0统计软件系统分析,a=0.05为显著性检验水准,P<0.05具有统计学意义。结果1.临床一般资料分析：重度子痫前期组和正常对照组中,年龄与生育次数之间,差异无统计学意义(P>0.05)。早发型重度子痫前期和早发型对照组孕周比较,晚发型重度子痫前期和晚发型对照组孕周比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。2. KISS-1mRNA的表达：与正常对照组比较,重度子痫前期组明显升高(P<0.05),其中早发型重度子痫前期组高于早发型对照组(P<0.05),晚发型重度子痫前期组表达量高于晚发型对照组,差异有统计学意义(P<0.05)；早发型重度子痫前期组表达量明显高于晚发型重度子痫前期组(P<0.01)；在正常对照组中,KISS-1mRNA在早发型对照组的表达量低于晚发型对照组(P<0.05)。3CRHmRNA的表达：与正常对照组比较,重度子痫前期组明显升高(P<0.05),其中早发型重度子痫前期组明显高于早发型对照组(P<0.05),晚发型重度子痫前期组表达量明显高于晚发型对照组,差异有统计学意义(P<0.01)；早发型重度子痫前期组表达量明显高于晚发型重度子痫前期组(P<0.01)；在正常对照组中,CRHmRNA早发型对照组的表达量低于晚发型对照组(P<0.01)。4. selectin-PmRNA的表达：与正常对照组比较,重度子痫前期组明显升高(P<0.05),其中早发型重度子痫前期组高于早发型对照组(P<0.01),晚发型重度子痫前期组表达量高于晚发型对照组,差异有统计学意义(P<0.01)；且早发型重度子痫前期组表达量明显高于晚发型重度子痫前期组(P<0.01)；在正常对照组中,selectin-PmRNA早发型对照组的表达量低于晚发型对照组(P<0.05)。5. KISS-1mRNA和CRHmRNA呈正相关(r=0.696,P<0.05),CRHmRNA和selectin-PmRNA呈正相关(r=0.897,P<0.05),KISS-1mRNA和selectin-PmRNA呈正相关(r=0.712,P<0.05)。结论1.CRHmRNA、KISS-1mRNA和selectin-PmRNA可能参与了子痫前期的发生发展。2.CRHmRNA、KISS-1mRNA和selectin-PmRN A在子痫前期的发生发展中可能起协同作用。3. CRHmRNA、KISS-1mRNA和selectin-PmRNA可能成为诊断子痫前期的指标。