丙戊酸钠对体外培养的人晶状体上皮细胞增生的抑制作用

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目的:探讨丙戊酸钠(sodium valproate,VPA)对体外培养的人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,HLECs)增生和细胞周期的影响。   方法:采用不同浓度的VPA(0.5mmol·L-1、1 mmol·L-1、2 mmol·L-1、4mmol·L-1)作用于人晶状体上皮细胞,四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测在不同时间点(24h、48h、72h)VPA对细胞增生的抑制作用;流式细胞仪测定VPA(1 mmol·L-1、2 mmol·L-1)作用于HLECs 48h后细胞周期分布情况;Western-blot测定在VPA(1 mmol·L-1、2 mmol·L-1)作用于HLECs 48h后,P21(细胞周期依赖性激酶抑制因子)在蛋白质水平表达量的改变。   结果:MTT检测显示VPA对体外人晶状体上皮细胞的增生的抑制作用呈时间和剂量依赖性。VPA作用48h后,各药物浓度组(0.5mmol·L-1、1 mmol·L-1、2 mmol·L-1、4mmol·L-1)细胞生长抑制率分别为11.05[%],21.58[%],26.67%和 38.25[%],流式细胞仪检测显示VPA可阻滞HLECs由G0/G1期向S期转换,使G0/G1期细胞增多,S期细胞减少。经2 mmol·L-1VPA作用48h,G0/G1期及S期细胞比例分别为85.40±3.90%和 7.35.±1.47[%],较阴性对照组(53.14±1.71%和 35.31±1.14[%])差异具有统计学意义(P<0.05)。Western blot检测发现VPA可促进P21蛋白质水平的表达。VPA处理48h后,各组平均灰度比值分别为0.582±0.082(1 mmol·L-1)和0.914±0.113(2 mmol·L-1),与阴性对照组(0.303±0.029)比较,差异有统计学意义(P<0.05).   结论:VPA可以通过促进P21表达,使人晶状体上皮细胞阻滞于G0/G1期,最终抑制人晶状体上皮细胞增生。
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