连翘有效成分的提取分离和肠道菌群代谢研究

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连翘为木犀科连翘属植物连翘Forsythia suspensa(Thunb.)Vahl的干燥果实,分为青翘和老翘。连翘具有抗菌抗病毒、解热镇吐、降压利尿、抗肝损伤、抗内毒素等作用。常用连翘治疗风热感冒、痈肿疮毒、淋巴结结核、尿路感染等症,为我国临床常用传统中药之一,具有较高的药用价值。连翘主要含有萜类、苯乙醇及其苷类、木脂素类、黄酮类和一些醇、酯、醚、醛、酮等类化合物,其中连翘苷、连翘脂素、齐墩果酸、芦丁、连翘酯苷是其作用的主要有效成分。本论文研究了连翘有效成分的提取分离,肠菌代谢作用。具体工作主要有以下几个方面:利用大孔树脂和制备型高效液相色谱对连翘进行了提取分离,从中得到2个化合物,通过理化常数测定,波谱数据分析及化学方法等,鉴定了2个化合物的结构,分别是连翘酯苷(forsythoside)(Ⅰ),芦丁(rutin)(Ⅱ)。结果表明,使用大孔树脂富集有效成分的同时,可除去大量杂质,为进一步操作提供方便。制备型高效液相色谱不仅能够得到高纯度的化合物单体,而且破坏少,操作方便,便于收集。观察和比较大鼠、家兔肠道菌群对连翘苷和芦丁单体的代谢作用。采用大鼠、家兔的新鲜粪便37℃厌氧培养,用HPLC-MS方法对代谢成分进行分离定量分析。结果,家兔肠道菌群对连翘苷和芦丁的代谢较快,而大鼠肠道菌群对连翘苷和芦丁的代谢过程相比较慢。在离体条件下,连翘苷和芦丁可以被大鼠、家兔的肠道菌群代谢,但不同种属动物之间存在差异。观察和比较大鼠、家兔肠道菌群对双黄连口服液中连翘苷和芦丁的代谢作用。采用大鼠、家兔的新鲜粪便37℃厌氧培养,用HPLC-MS方法对代谢成分进行分离定量分析。结果,家兔肠道菌群对连翘苷和芦丁的代谢较快,而大鼠肠道菌群对连翘苷和芦丁的代谢过程相比较慢。在离体条件下,双黄连口服液中连翘苷和芦丁可以被大鼠、家兔的肠道菌群代谢,但不同种属动物之间存在差异。通过离体实验研究家兔肠道菌群对连翘苷和芦丁的代谢作用,推断代谢产物的可能结构。将连翘苷和芦丁分别加入家兔肠菌孵育液中,温孵10小时后,以HPLC—MS法检测体外实验代谢产物,推断其代谢产物可能为连翘脂素和槲皮素。
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