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目的:脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)是神经系统疾病的多发病和常见病,急性期病死率较高,目前尚缺乏有效的治疗手段。高压氧(hyperbaric oxygen ,HBO)疗法是指机体在高气压(高于标准大气压)环境中所呼吸的与环境等压的纯氧以达到治疗各种疾病的方法。HBO治疗缺血性脑卒中的疗效已经得到肯定,其对脑出血的治疗目前尚缺乏循证医学的证据,脑出血后引起的继发性脑水肿是脑出血患者死亡的主要原因之一,有临床研究表明HBO能有效的减轻患者脑出血后继发的脑水肿,从而可能有利于患者神经功能的恢复,其具体机制目前尚未明确。水通道蛋白(AQPs)它是一种膜蛋白,广泛分布于机体的不同组织器官中,介导不同类型细胞膜的跨膜水转运。已从哺乳动物组织中鉴定出13种水通道蛋白,其中水通道蛋白-4(AQP-4)是脑组织中含量最多、分布最广的水通道蛋白, AQP-4的结构和其他的水通道蛋白类似,其主要功能为介导细胞内外水的转运。目前研究证明在正常脑组织中AQP-4处于低表达状态,细胞性脑水肿与血管源性脑水肿会影响其表达,通过其表达水平的测定可以反映高压氧在减轻脑水肿方面是否与其相关。本实验采用SD(Sprague-Dawley)大鼠用两种不同的方法建立脑出血模型,采用高压氧及高压氧预处理的方法进行干预,观察脑出血大鼠的神经行为,并测定大鼠脑出血周围水肿含量及APQ-4的表达,旨在比较高压氧对两种脑出血模型的影响,高压氧预处理对大鼠的出血耐受,研究高压氧减轻脑水肿同AQP-4表达水平的关系。方法:1动物分组:将156只健康成年雄性SD大鼠,体重350-380g,随机分为:①假手术组6只(SHG);②自体血诱导对照组(A-ICH)30只;③胶原酶诱导对照组(C-ICH)30只;④(A-ICH+HBO)实验组30只;⑤(C-ICH+HBO)实验组30只;⑥高压氧预处理实验组(HBO-PC)30只,后五组又随机分为术后24h、48h、72h、5d、7d五个时间点组,每组6只大鼠。2脑出血实验动物模型:分别应用自体血注入和胶原酶诱导两种方法制备右侧ICH模型。3高压氧处理:采用单体婴儿高压氧舱对实验组大鼠进行高压氧暴露,加压时间为15min,稳压为0.10MPa,容器内氧浓度控制在90%以上,持续吸氧60min,舱内温度控制在24。C左右,减压时间为15min,每日一次,对照组不做高压氧治疗。4神经功能评定:实验组大鼠经高压氧治疗后6h,同对照组大鼠一起分别在对应时间点应用改良的longa分级法进行行为学评分:0分,无神经缺陷症状;1分,不能伸展手术对侧前肢;2分,手术对侧前肢屈曲;3分,轻度向手术对侧转圈;4分,严重向手术对侧转圈;5分,向手术对侧跌倒。5脑组织含水量测定:采用干湿比重法,对去除额极后的脑组织,留取病变侧约4mm厚用于脑含水量的测定。6具体实验内容:实验一:采用免疫组化的方法测定脑出血周围AQP-4的表达,观察高压氧对AQP-4表达的影响。实验二;比较高压氧治疗在两种不同脑出血模型方面的优点和缺点。实验三:将实验大鼠用高压氧进行5d预处理干预后,制备脑出血模型,评定高压氧预处理对脑出血的耐受情况。结果:1动物模型制备成功率:自体血注入ICH模型成功率为50%,分别低于国外、国内报道的71%和79%。胶原酶诱导ICH模型的成功率为55%,相对高于自体血注入ICH模型。2行为学观察:A-ICH+HBO组同A-ICH组比较,神经功能评分的差异没有统计学意义(P>0.05)。实验组中,自体血ICH模型同胶原酶诱导ICH模型之间神经功能评分有统计学意义(P<0.05)。高压氧预处理组同对照组比较,两组之间的差异没有统计学意义(P>0.05)。3脑组织含水量测定:在总体上实验组大鼠的脑组织含水量明显低于对照组,在脑水肿高峰期差异显著(P<0.05)。实验组中,自体血ICH模型组同胶原酶诱导ICH模型组之间脑组织含水量比较,自体血ICH模型的含水量低于胶原酶诱导模型组,有统计学意义(P<0.05)。高压氧预处理组同对照组比较,两组之间的差异有统计学意义(P<0.05)。4出血灶周围AQP4的表达:脑出血后大鼠脑组织中AQP-4在各组中均有表达,假手术组呈低表达状态,正常对照组在脑出血24h后开始升高,48h达到高峰,72h后开始逐渐降低,7d时表达水平同假手术相近,但仍高于假手术组。在总体上,高压氧治疗组同对照组比较,治疗组AQP-4的表达水平明显降低,在脑水肿高峰期48h时两者差异较明显,其差异具有统计学意义(P<0.05),在实验组中,自体血ICH模型组同胶原酶诱导ICH模型组之间比较,自体血ICH模型组AQP-4的表达低于胶原酶诱导模型组,有统计学意义(P<0.05)。高压氧预处理组同对照组比较,在24h、48h、7d三个时间点高压氧预处理组AQP-4的表达低于正常对照组,具有统计学意义(P<0.05)。结论:1从神经行为学方面,高压氧治疗可以减轻脑出血后的行为损伤,使神经功能得到有效的恢复。2高压氧治疗能在脑出血水肿高峰期48h时有效减轻脑水肿。3高压氧对于两种ICH模型脑水肿及出血灶周围AQP-4的表达都有影响,其脑组织含水量的减少同下调AQP-4的表达相关。4比较两组ICH模型发现,自体血注入ICH模型在高压氧治疗中的敏感性更高,自体血模型更适合研究高压氧在治疗脑出血方面的研究。5高压氧预处理能减轻脑出血后继发的脑水肿,能下调AQP-4的表达,增强大鼠对出血耐受。