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利尿药(diuretics)是一类通过促进肾脏排尿功能而增加尿量的药物。在临床上根据利尿效能将利尿药划分为高效能、中效能和低效能三个等级。其中,高效利尿药,又称髓襻利尿药。主要包括呋塞米、托拉塞米及依他尼酸等。目前在临床上呋塞米和托拉塞米的应用较为广泛,二者无论是在药效上还是在药物用途上,均具有特殊的地位。因此,本文主要以呋塞米和托拉塞米为研究对象,研究、发展和建立了快速简便的测定呋塞米和托拉塞米的吸收、荧光光谱法、共振瑞利散射(Resonance Rayleigh Scattering, RRS)、二级散射(Second-Order Scattering, SOS)和倍频散射(Frequency Doubling Scattering, FDS)方法。同时,将这些方法运用于实际样品的检测中,结果满意。本文主要研究如下:1.呋塞米-Pd(Ⅱ)螯合物与某些碱性三苯甲烷类染料相互作用的共振瑞利散射和共振非线性散射光谱及其分析应用在pH 4.5~7.0的Britton-Robinson (BR)缓冲溶液中,呋塞米(FUR)与Pd(Ⅱ)形成1:1的螯合阴离子,它能进一步与乙基紫(EV)、结晶紫(CV)、甲基绿(MeG)、亮绿(BG)、甲基紫(MV)等碱性三苯甲烷染料(BTPMD)阳离子通过静电引力和疏水作用形成FUR:Pd(II):BTPMD为1:1:1的离子缔合物。此时,该离子缔合反应不仅能引起吸收光谱的变化,而且更能导致共振瑞利散射(RRS)、二级散射(SOS)和倍频散射(FDS)的显著增强,其最大RRS波长分别位于324nm (EV, CV和MV体系)和340 nm(BG和MeG体系),最大SOS波长分别位于550nm(EV, CV, BG和MeG体系)和530nm(MV体系),而最大FDS波长均位于392 nm附近。在一定条件下三种散射增强(△IRRS,AISOS和△IFDS)均与呋塞米(FUR)的浓度成正比。对不同染料体系,三种方法对FUR的检出限分别在0.3-4.9 ng-mL-1(RRS),3.2~33.1 ng-mL"’(SOS)和9.0-85.7 ng.mL-1(FDS)之间,均可用于痕量FUR的测定。研究了三元离子缔合物的形成对吸收, RRS, SOS和FDS光谱特征和强度的影响,考察了适宜的反应条件、影响因素和分析化学性质,并以RRS法为例考察了共存物质的影响。据此提出了一种高灵敏度、简便、快速测定FUR的共振光散射新方法,将其用于片剂、注射液、人血清和尿样中FUR的测定,结果满意。文中还对三元离子缔合物的组成、结构和反应机理进行了讨论。2.Ag(Ⅰ)-呋塞米相互作用的共振瑞利散射、二级散射和倍频散射光谱及其分析应用在pH3.5的HAc-NaAc介质中,FUR与Ag(Ⅰ)形成1:1的螯合物,从而引起共振瑞利散射(RRS)、二级散射(SOS)和倍频散射(FDS)光谱显著增强,其最大RRS,SOS和FDS波长分别位于310、584和330 nm。在一定范围内,三种散射增强(△IRRS,△ISOS和△IFDS)均与呋塞米浓度成正比。该方法具有较高灵敏度,RRS, SOS和FDS法对FUR的检出限(3σ)分别为1.3 ng-mL-1、3.0 ng-mL-1和6.9 ng-mL-1。考察了适宜的反应条件和共存物质的影响,结果表明方法具有良好的选择性。据此,提出了简便、快速、准确且高灵敏测定痕量呋塞米的光散射新方法,并应用于片剂和尿样中呋塞米的测定。同时对反应机理和散射光谱增强的原因进行了讨论。3.钯(Ⅱ)-托拉塞米反应体系的共振瑞利散射和共振非线性散射光谱及其分析应用在pH 4.0~7.0的Britton-Robinson(BR)缓冲溶液中,托拉塞米(TOR)与Pd(Ⅱ)形成1:1的缔合物,此时将引起共振瑞利散射(RRS)、二级散射(SOS)和倍频散射(FDS)显著增强,其最大RRS、SOS和FDS波长分别位于340,586和349 nm附近。在一定范围内,三种散射增强与托拉塞米的浓度成正比,方法具有较高的灵敏度,对托拉塞米的检出限(3σ)在1.1-5.5 ng-mL-1之间。考察了适宜的反应条件及共存物质的影响,表明方法有良好的选择性。据此,提出了测定痕量托拉塞米的灵敏、简便和快速的新方法。4.托拉塞米与12-钨磷酸相互作用的共振瑞利散射和共振非线性散射光谱及其分析应用在pH 0.6-1.1的NaAc-HCl缓冲溶液中,TOR与12-钨磷酸(TP)形成3:1的离子缔合物,此时将引起共振瑞利散射(RRS)、二级散射(SOS)和倍频散射(FDS)的显著增强,并且出现新的散射光谱,其最大RRS、SOS和FDS波长分别位于370,666和388 nm附近。在一定范围内,三种散射增强(△IRRS,△ISOS和△IFDS)与托拉塞米的浓度成正比,方法具有较高的灵敏度,三种方法对托拉塞米的检出限(3σ)分别为0.7173 ng-mL"1,7.007 ng-mL"1和10.90 ng-mL-1。考察了适宜的反应条件和共存物质的影响,方法有良好的选择性。据此,提出了一种灵敏、简便和快速测定痕量托拉塞米的新方法,并可用于片剂和尿样中托拉塞米的测定。5.荧光光谱法研究托拉塞米与牛血清白蛋白的相互作用及其分析应用在pH7.40和离子强度0.15 mol-L-1的模拟生理条件下,TOR对牛血清白蛋白(BSA)的内源荧光产生较强的猝灭作用。从吸收光谱的变化、温度对猝灭作用的影响及猝灭常数判断该猝灭作用是TOR与BSA形成基态配合物而导致的静态猝灭过程。文中计算了TOR与BSA的结合常数K、结合位点数n和相关的热力学函数。在最大猝灭波长342 nm处,荧光猝灭程度(△F)与托拉塞米的浓度成正比,线性范围和检出限分别为0.02~5.0μg-mL-1和6.3ng-mL-1。本文还研究了适宜的反应条件,考察了共存物质的影响,表明方法具有较好的选择性,据此提出了以BSA为探针快速测定痕量TOR的荧光光谱新方法,适用于片剂和尿样中托拉塞米的测定。