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膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤之一,移行细胞癌(TCC)是其最常见病理类型。肿瘤分级、分期是目前评估膀胱移行细胞癌恶性程度、预测肿瘤预后的最常用指标,但由于肿瘤的生物学异质性,单以分级分期来评估预后有一定的局限性。血小板源性的内皮细胞生长因子(PD-ECGF)是一种促血管生成因子,多数研究认为PD-ECGF与膀胱肿瘤分级、肿瘤复发、预后显著相关,但其与膀胱肿瘤分期、肿瘤微血管密度(MVD)相关性的认识目前仍存在分歧。 本研究对52例膀胱移行细胞癌组织的石蜡切片采用免疫组织化学方法检测其PD-ECGF表达、微血管内皮细胞着色,并以一目前已证实为膀胱TCC中强促血管生成因子——血管内皮生长因子(VEGF)为对照,试图探讨PD-ECGF、VEGF与膀胱TCC临床病理特征、MVD之间的关系。 材料与方法 病人与组织来源:1994~1995年间浙江大学医学院附属第一医院泌尿外科原发性膀胱TCC患者52例:男性37例,女性15例,年龄30~79岁,平均62.8岁;TURBt获得者32例,部切19例,全切1例;肿瘤单发32例,多发20例;初发35例,复发17例。肿瘤分级按WHO标准:G1级17例,G2级27例,G3级8例。临床分期按UICC标准:Tis~T1为30例,T2为18例,T3为2例,T4为2例。8例正常膀胱组织,6例为良性前列腺增生患者的膀胱组织,2例为非正常死亡的新鲜膀胱组织,均为男性,年龄32~75岁,平均64.4岁。 随访资料:通过入户访问,结合电话调查方式对所有52例入选病例进行5 硕士研究生学位论文年随访。52例患者中1例失访,l例随访期内因它疾死亡,l例全切无法统计复发,49例得到成功随访。其中术后复发 28例,未复发 21例(无瘤生存率 42.9%);术后死亡10例,五年存活39例(总生存率79.6%)。 实验方法:应用Envision兔疫组织化学染色方法检测正常膀耽组织与膀眈TCC中的 PD-ECGF、VEGF表达和 MVD分布。 结果判定:PD-ECGF、VEGF以细胞浆或胞核出现清晰着色为阳性标志,染色结果以阳性细胞百分比结合染色强度综合计分作定性分析。阳性细胞百分比:无记为0,<25%记为1,26—50%记为2,>50%记为3;未着色记为0,淡黄色记为1,棕黄色记为2,棕褐色记为3。定性标准:两项得分相加0—3分为阴性,4~6分为阳性。选择微血管内皮细胞着色密集区(热岛),计数五个 400 X高倍视野微血管数,取其平均值即为每高倍视野MVD。 统计方法:本实验所有数据处理均在Duron700微机上用SPSS 10.0软件包完成,其中计数资料相关性统计采用卡方检验,计量资料相关性统计采用非参数统计方法,多因素回归分析采用COX模型完成。 结果 一、PD-ECGF在膀恍TCC及正常膀耽组织中的表达:52例膀眺TCC组织标本中PD-ECGF表达阳性率50%,8例正常膀肌组织标本PD-ECGF表达全为阴性。行Fisher精确概率检验,P(.01,有极显著性差异。 二、PD-ECGF表达与膀眈TCC病理、临床特征及预后的关系:随肿瘤级别升高,PD-ECGF表达阳性率增高,P<0.01,有极显著性差异;随肿瘤分期上升,PD-ECGF阳性率增高,但行卡方检验P>0.05,无显著性差异,另以h-T。与T;一T。分两组,行卡方检验P<0.05,差异显著;PD-ECGF与肿瘤单/多发、初/复发均无显著相关,P>0.05;术后再发组PD-ECGP表达阳性率远高于未再发组,卡方检验示K.05,有显著性差异,浅表性肿瘤中术后再发组PD-ECGF表达阳性率也高于未再发组,但P二0.071,未发现统计学差异:PD-匹GF与肿瘤预后,无显著相关性,P川.05。 3 硕士研究生学位论文 三、VEGF在膀跳TCC及正常膀腕组织中的表达:52例膀眺TCC组织标本中VEGF阳性率sl.9%,8例正常膀眺组织标本中VEGF表达均为阴性。行Fisher精确概率检验,P<0.01,有极显著性差异。 四、VEGF表达与膀眯TCC病理、临床特征及预后的关系:本次实验中未发现VEGF表达与肿瘤分级、分期。单/多发、初/复发、术后再发、预后的相关性,行卡方检验,均P>0.05。 五、正常膀肌组织与膀眺冗C中的WD分布:52例膀眺TCC组织标本中MVD分布 16.2—75.0(38.432土 16.425),8例正常膀眺组织标本中 gro分布 4.4—23*4 (11.225土5.961),Mann-whitnev检验示卜。001,有极显著性差异。为方便统计,分别以22、37、52为节点,将膀腕TCC中MVD分为低、中、高、极高四组。 六、MVD分布与膀眯TCC病理、临床特征及预后的关系;对肿瘤不同级别、期别、单/多发、初/复发、再发/未再发、存活/死亡分别分组,对其微血管密度 (MVD)行卡方检验,均未发现有显著性差异,P)0.05。