基因芯片制作中寡核苷酸或DNA的共价固定

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该文介绍了寡核甘酸或DNA在经过适当处理的玻璃片、PMMA或PS等高分子薄片上共价固定的研究结果.1 对北普通玻璃和石英玻璃载体,发现石英玻璃在荧光检测下背景吸收弱并且单一,适合于用荧光扫描法检测;石英玻璃片与氨基硅烷化试剂反应在其表面连上氨丁基四乙氧基硅烷基,继而与异硫氰酸酯反应后能与5端或3端氨基修饰的寡核苷酸反应,适合于寡核苷酸或DNA的共价固定;将氨基硅烷化的石英玻璃片和进口的玻璃芯片直接和荧光修饰的1,4-苯二异硫氰酸酯(PDITC)作用,经荧光扫描分析,证明自制芯片的固定效果达到甚至超过国际同类芯片的水平.2 PMMA薄片水解后以亚氨基二乙酸处理,能明显增加表面羧基密度,表明在PMMA表面可能形成了羧基密度成倍增加的树状体结构,PMMA薄片表面经过以上两步修饰后,在EDAC存在下,可有效地共价固定荧光标记的寡核苷酸.如将PMMA基片先经微加工增加其比表面积,再按上述过程进行表面修饰,可望进一步提高对寡核苷酸或DNA固定的密度.但所形成的树状体的结构有待进一步确证.3 通过两条合成路线对聚苯乙烯进行功能基化,经多步反应分别得到了醛基活化的聚苯乙烯和琥珀酰亚胺酯活化的聚苯乙烯.
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