【摘 要】
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目的观察人肝细胞生长因子基因修饰的骨髓间充质干细胞（h HGF-MSCs）对脂多糖（LPS）诱导的大鼠急性肺损伤后肺纤维化的影响。方法（1）为评价LPS诱导的大鼠急性肺损伤后的肺纤维化（PF）,取7周龄的清洁级雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠20只,体重180-220 g,将大鼠随机分为阴性对照组（Control组）,LPS处理组（LPS组）。LPS组大鼠采用LPS三次给药法建立PF模
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目的观察人肝细胞生长因子基因修饰的骨髓间充质干细胞（h HGF-MSCs）对脂多糖（LPS）诱导的大鼠急性肺损伤后肺纤维化的影响。方法（1）为评价LPS诱导的大鼠急性肺损伤后的肺纤维化（PF）,取7周龄的清洁级雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠20只,体重180-220 g,将大鼠随机分为阴性对照组（Control组）,LPS处理组（LPS组）。LPS组大鼠采用LPS三次给药法建立PF模型。LPS组分别于第三次给药后第7、14、21天处死大鼠,留取肺组织。HE、Masson染色观察炎症和纤维化程度,肺损伤评分评价肺损伤程度,Ashcroft评分评价肺纤维化程度;碱水解法测定肺组织羟脯氨酸（HYP）含量。（2）为观察h HGF-MSCs对LPS诱导的大鼠急性肺损伤后肺纤维化的影响,取SD大鼠28只,将大鼠随机分为4组（每组n=7）,阴性对照组（Control组）,LPS处理组（LPS组）,空载体慢病毒转导的骨髓间充质干细胞组（LPS+EGFP-MSCs组）和人肝细胞生长因子基因转导的骨髓间充质干细胞组（LPS+h HGF-MSCs组）。LPS三次给药后建立大鼠急性肺损伤后肺纤维化（PF）模型。Control组气管内给予等量生理盐水。第三次给药后第一天,Control组和LPS组大鼠经尾静脉注射DMEM1 ml。LPS+EGFP-MSCs组大鼠注射含2×106个EGFP-MSCs的DMEM 1 ml。h HGF-MSCs组注射含2×106个h HGF-MSCs的DMEM 1 ml。所有大鼠于第21天后留取。HE、Masson染色观察炎症和纤维化程度,Ashcroft评分评价肺纤维化程度;碱水解法测定肺组织羟脯氨酸（HYP）含量;ELISA法测肺泡灌洗液（BALF）中TGF-β、TNF-α、IL-6和IL-10含量。免疫印迹法检测肺组织Vimentin、E-cadherin和α-SMA蛋白表达情况。同时检测肺组织的氧化应激水平[丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性]的改变。结果（1）LPS刺激后,大鼠肺组织病理改变第7天以肺部炎症反应为主,21天以胶原纤维沉积为主。与Control组相比,LPS组大鼠在14天、21天时Ashcroft评分升高、肺组织HYP含量增加（P<0.05）。（2）相比于Control组,LPS组病理损伤严重,Ashcroft评分、肺组织HYP含量显著增加,BALF中TGF-β、TNF-α和IL-6含量显著升高,肺组织MDA含量显著升高、SOD活性显著降低,Vimentin、α-SMA蛋白表达明显升高、E-cadherin蛋白表达明显降低（P<0.05）;相比于LPS组,LPS+EGFP-MSCs和LPS+h HGF-MSCs组病理损伤减轻,LPS+h HGF-MSCs组Ashcroft评分显著降低（P<0.05）;相比于LPS组,LPS+EGFP-MSCs组肺组织HYP含量显著减少,BALF中TGF-β、TNF-α和IL-6含量显著降低、IL-10含量显著增加,肺组织MDA含量显著降低、SOD活性显著降升高,Vimentin、α-SMA蛋白表达水平明显降低、E-cadherin蛋白表达水平明显升高（P<0.05）;相比于LPS+EGFP-MSCs组,LPS+h HGF-MSCs组肺组织HYP含量显著减少,BALF中TGF-β、TNF-α、IL-6含量显著降低,肺组织SOD活性显著增加,Vimentin、α-SMA蛋白表达水平显著降低（P<0.05）。结论（1）通过采用LPS三次给药法可建立大鼠急性肺损伤后肺纤维化模型。（2）HGF-MSCs具有比EGFP-MSCs更好的抗急性肺损伤后肺纤维化的作用,其机制可能与减轻肺内炎症反应和氧化应激以及抑制上皮-内皮间充质转化有关。
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