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肌生成抑制素前体肽(MyostatinProDomain，MPD)是肌生成抑制素前体蛋白被水解加工后产生的N-端肽，它可以抑制肌生成抑制素成熟肽(C．端肽)的活性，从而促进肌肉的生长。电脉冲作为一种基因转移方法在体内外已经被广泛用来介导基因转移到名种类型的细胞中。本试验利用电脉冲基因导入仪介导含有MPD基因的质粒载体进入体外培养的小鼠骨骼肌细胞以及转导质粒进入小鼠骨骼肌内。本文目的是研究通过电脉冲介导含有MPD基因的质粒对体外培养小鼠骨骼肌细胞的增殖和对活体小鼠骨骼肌生长发育的影响。试验结果显示，电脉冲无论作用在体外培养的骨骼肌细胞和活体上，都能高效率地转导MPD基因进入骨骼肌中；MPD基因进入细胞后，能在细胞内有效地表达，促进体外骨骼肌细胞和肌肉的生长。本试验结果同时也为今后建立系统的电穿孔技术提供参考。试验可分为以下三个部分：
(1)体外培养3周龄小鼠骨骼肌卫星细胞。采用胶原酶24h消化法处理小鼠后腿骨韶肌，使大量的卫星细胞释放出来，然后利用差速贴壁法纯化细胞，获得高纯度、高活率、高得率的卫星细胞。
(2)MPD质粒对细胞增殖的影响。试验设脉冲处理组、纯质粒组和对照组。对于脉冲处理组，配置密度为1×105的纯化细胞悬液，加入MPD质粒(1μg／m1)，调节200v／cm的电场强度，连续进行4次脉冲。纯质粒组为只加MPD质粒，不采用电脉冲处理。用MTT法检测MPD质粒对骨骼肌卫星细胞增殖的影响。结果是电脉冲组与其他两组的活细胞数在转染后96h差异显著(P＜0．05)，在转染后120h差异极显著(P＜O.01)。试验表明电脉冲瞬间刺激能有效地转导MPD基因进入到细胞内，MPD基因进入到细胞后能在细胞内进行有效的表达，促进细胞的增殖。
(3)MPD质粒对小鼠肌肉生长发育的影响。试验分脉冲处理组、纯质粒处理组和对照组。对于脉冲处理组，采用普通注射器注射MPD基因质粒到4周龄和6周龄小鼠后腿肌肉中，在注射后1-2分钟内在注射点附近给予电场强度为200v／cm的脉冲刺激，连续进行4次刺激。对于纯质粒处理组则只做质粒的普通注射。通过累积增重、屠宰和肌肉切片数据分析MPD质粒对小鼠肌肉生长的影响。试验结果表明，在对小鼠的体重影响方面，MPD质粒对雄性小鼠的增重效果要优于雌性小鼠。雄性小鼠电脉冲组在质粒注射中、后期有明显的增加体重的趋势，累积增重最高时比对照组提高19．5％，差异显著(P<0．05)。在对小鼠屠宰分析中发现，雄性纯质粒组与对照组的躯干重、前肢重、腹脂重三个性状都有显著的差异。雄性脉冲组与纯质粒注射组的活体重、屠体重、后肢重、腹脂重等性状都有显著的差异(P＜0．05)。而在雌鼠，脉冲组与质粒组和对照组之间的活体重、屠体重、前肢重、腹脂重四个性状都有显著差异(P＜O．05)。从肌肉组织切片中看出，雌性小鼠和雄性小鼠的肌纤维直径和横截面积在对照组、纯质粒组和脉冲组逐步增大，分别为16．96／240，18．6／273和21．4／359~以及17．5／250，19．6／309和22．2／399,脉冲组与纯质粒组和对照组间都有着显著的差异(t<0．05)。