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帕金森病患者典型的病理变化是选择性黑质多巴胺能神经元死亡,近年来有多个与细胞毒性机理有关的假设被提出,包括氧化应急、细胞凋亡和线粒体功能异常等。近来,临床和实验数据均说明小胶质细胞激活引起的神经炎症的改变能导致神经元退化。试验表明,细菌脂多糖(LPS)能诱导多巴胺能神经元的炎症反应。有效的治疗应该不仅能改变疾病相关症状,而且能抵制胶质细胞激活、炎症因子增高和多巴胺细胞程序性死亡。本研究在小鼠胚胎(12d～14d)中脑原代细胞培养的基础上,测定分析了LPS引发胶质细胞过度激活、炎症因子过度增高等炎症反应及相关药物对神经保护作用,获得了以下结果:1.将OF1/SPF小鼠胚胎中脑原代细胞(包括神经元和胶质细胞)混合培养,大肠杆菌LPS(E.coli, L8274)各剂量组(50~400μg/mL)均能显著破坏TH+神经元,100μg/mL LPS可导致30%～50 %神经元丢失。LPS同样影响其他神经细胞,比如星形胶质细胞和NeuN+神经细胞。多巴胺能神经元形态改变表现为树突及分支的丢失和细胞核的退化。鼠伤寒沙门氏菌LPS呈现更高的毒性。作为炎症参数,一氧化氮形成与LPS浓度(6.25～200μg/mL)呈正相关;当LPS浓度为200μg/mL时,一氧化氮形成达到高峰。前列腺素E2 (PGE2)活性提高也呈剂量依赖性,同时反映了诱导型一氧化氮合成酶的提高。2.已有研究表明人参的活性成分人参皂甙具有抗氧化和抗炎的功效,其中人参皂甙Rd能影响一氧化氮浓度。本研究发现,在多巴胺能神经细胞培养中,人参皂甙Rd能部分降低LPS毒性。同仅用LPS处理的对照组相比,人参皂甙Rd(1～50μmol/L)具有显著的神经保护作用,1μmol/L和10μmol/L人参皂甙Rd分别提高23%和28%的神经元数量。人参皂甙Rd神经保护活性与LPS导致细胞死亡一样,对多巴胺能神经细胞没有选择性,同样对NeuN+神经细胞没有选择性。1μmol/L或10μmol/L人参皂甙Rd与LPS处理组共培养,能够剂量依赖性抑制LPS刺激一氧化氮的产生,并且,1μmol/L和10μmol/L人参皂甙Rd显著减少LPS导致的PGE2的合成。3.我们将非甾体抗炎药物吲哚美辛用来与人参皂甙Rd对神经保护作用相比较,结果显示,这种化合物同样能部分减少LPS损伤培养细胞的上清液中的一氧化氮水平。对其他用来治疗帕金森病的药物的研究结果证实,作为治疗帕金森病的金标准的左旋多巴能减少一氧化氮的水平,多巴胺激动剂溴隐亭能部分逆转一氧化氮水平,一氧化氮与LPS导致神经毒性密切相关。本研究结果表明,LPS导致多巴胺能神经元退行性变化,被激活的胶质细胞产生自由基,比如出现一氧化氮和过氧亚硝基阴离子是主要的神经毒性中介体。而且,环氧合酶-2和PGE2的增高也可能引起多巴胺能细胞的退变。人参皂甙Rd神经保护机理除抗氧化和自由基的清除外,其神经保护机理可能包括抗炎作用,比如干涉诱导型一氧化氮合成酶和环氧合酶-2的表达。而对左旋多巴和溴隐亭的辅助作用,则可能与多巴胺受体的补充促进作用或者部分非特异性作用比如螯合物形成有关。