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目的:探讨京尼平苷对体外培养大鼠膝关节软骨细胞的活化作用,为京尼平苷治疗骨关节炎提供理论依据。 方法:1.通过体外分离培养大鼠软骨细胞,倒置相差显微镜和透射电镜观察其生长情况和细胞结构,应用免疫细胞化学法和RT-PCR方法对软骨细胞鉴定,MTT比色法描绘细胞的生长曲线,检测其生长状态。2.将 P3软骨细胞分为空白对照组、京尼平苷不同浓度组传代培养,应用MTT比色法检测细胞增殖、流式细胞术分析细胞周期、RT-PCR检测 II型胶原 mRNA表达、Western blot法检测 II型胶原蛋白合成。 结果:1.酶消化法分离培养的软骨细胞活性优良,能够表达 II型胶原蛋白,具有软骨细胞的原有表型。2.与对照组比较,京尼平苷可促进软骨细胞增殖(P<0.05);减少 Gl期细胞含量,S期含量增多(P<0.05);促进软骨细胞 II型胶原的表达合成(P<0.05)。 结论:1.酶消化法软骨细胞的分离培养可以提供活性良好的软骨细胞。2.京尼平苷具有显著的抗软骨细胞退变老化作用,对软骨细胞具有活化作用。3.京尼平苷为栀子治疗骨性关节炎的有效单体成分。