车前子盐炙工艺与质量标准研究

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目的:1.本论文以车前子为研究对象,通过正交实验法优选出车前子盐炙工艺。2.利用紫外分光光度法对车前子炮制前后其单糖组成的变化进行研究。3.车前子盐炙最佳工艺基础上,采用高效液相色谱法对十批不同产次车前子质量标准进行评价。材料与方法:1材料十批不同产地的车前子生品及盐炙品2方法2.1采用正交试验方法,对车前子盐炙工艺进行优选,确定车前子盐炙最佳炮制工艺;选取炮制温度,炮制时间,盐水浓度,盐水体积作为考察因素,各因素设计3个水平;波长切换进行检测,京尼平苷酸(254nm);毛蕊花糖苷(322nm);柱温为30℃;进样体积为20μL;流动相A为甲醇,流动相B为0.5%醋酸水溶液(A+B=100%);选用京尼平普酸、毛蕊花糖苷为评价指标,运用高效液相色谱法进行测定。2.2采用柱前衍生-HPLC法对车前子炮制前后单糖组成变化进行研究;2.3利用高效液相色谱法,色谱条件色谱柱:Welchultimate XB-18(4.6mm×250mm,5μm);检测波长:京尼平苷酸(254nm,020min);毛蕊花糖苷(322nm,2050min);流速为1.0mL/min;柱温为30℃;进样体积为20μL;流动相A为甲醇,流动相B为0.5%醋酸水溶液(A+B=100%),流动相超声除气泡,梯度洗脱。该色谱条件下,京尼平苷酸、毛蕊花糖苷保留时间分别为17min、44min。对车前子质量标准进行研究,通过对十批不同批次生品及盐炙品中京尼平苷酸、毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷3个成分进行含量测定。结果:1.通过正交实验设计L9(34),确定车前子盐炙工艺;优选出车前子最佳炮制工艺为:最佳盐炙工艺是取净车前子,炮制温度160一1800C,有爆鸣声,香气溢出时喷洒浓度5%盐水,加其重量40%(mL/100 g)的盐水,炮制7min,取出,自然放干,放凉。2.甘露糖、木糖炮制后含量有所增加,半乳糖、阿拉伯糖含量有所降低。3.波长切换法对十批车前子炮制前后京尼平苷酸、毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷含量进行了测定。京尼平苷酸、毛蕊花糖苷和异毛蕊花糖苷浓度分别在0.007350μg/m L;0.04200g/mL;0.09450μg/mL范围内与峰面积呈现良好的线性关系。结论:1.本实验通过正交试验,优化车前子盐炙工艺。《中华人民共和国药典》炮制规范规定盐炙车前子,每100kg净车前子用食盐2 kg。本实验选择车前子《中华人民共和国药典》收录的两个指标性成分京尼平苷酸和毛蕊花糖苷,结果更加客观、精确。本实验与《中华人民共和国药典》炮制规范相比更加具体、清晰、完善和全面,为车前子盐炙工艺的优化奠定了理论基础。2.通过柱前衍生-HPLC法对车前子炮制前后单糖组成变化研究发现,车前子盐炙前后单糖组成有明显变化,在以后的研究中应考虑炮制对单糖的影响。3.从选取的10个不同产地的车前子生品中可以明显的看出,不同产地其所含的京尼平苷酸、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷以及多糖的含量均有不同。所以在研究车前子质量控制的实验中,应考虑到产地、生品及盐炙品的因素影响,使实验结果更具说服力。
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