论文部分内容阅读
目的 通过将早产大鼠长期暴露于高浓度氧下，制作支气管肺发育不良（bronchopulmonary dysplasia，BPD）模型，研究早产大鼠血清皮质醇（glucocorticoid，GC）浓度和肺内糖皮质激素受体（glucocorticoid receptor，GR）表达的动态变化，探讨其与BPD发生之间的关系，以期指导应用GC治疗BPD。 方法 妊娠第21d剖宫产娩出的早产大鼠随机分为实验组和对照组，实验组大鼠持续吸入＞90％ O2，对照组大鼠呼吸空气。于生后1d、3d、7d、14d和21d随机从两组中取仔鼠处死，分离肺组织，制备组织切片，进行HE染色，光镜下观察肺脏病理改变，进行肺纤维化评分。于生后3d、7d和14d，从两组中随机选取仔鼠断头取血，应用放射免疫法测定血清皮质醇浓度；于生后1d、3d、7d、14d和21d，从两组中随机选取仔鼠处死，制备肺组织切片，应用兔抗大鼠GR的多克隆抗体进行GR免疫化学染色，通过图像分析技术测定积分光密度，对GR表达进行半定量分析。取生后3d、7d和14d的两组大鼠肺组织匀浆提取蛋白，应用western blot法测定GR蛋白表达。 结果 高氧组早产大鼠肺脏早期表现出肺泡上皮细胞和毛细血管内皮细胞破坏、肺泡内及肺间质中出现包括嗜中性粒细胞等在内的炎症细胞渗出和肺泡萎陷、出血，后期随着纤维组织和平滑肌增生，肺泡隔厚度增加，符合BPD样病理改变。生后1d时两组大鼠肺纤维化评分无显著性差异（P＞0.05），生后3d、7d、14d和21d时，高氧组肺纤维化评分均明显高于对照组（P＜0.05）。对照组早产大鼠血清皮质醇浓度在各时间点无显著性改变，平均值波动在16.5～18.0ng／ml之间。实验组大鼠的血清皮质醇浓度在生后3d时与对照组无显著性差异（n=25，P=0.56），在生后7d时显著高于对照组（n=25，P=0.04），均值达到21n扩耐。在生后14d时显著低于对照组（n二21，P二0.0018），均值降至11 .On岁血。肺组织免疫组织化学染色分析显示生后1周内，对照组大鼠肺内GR表达逐渐增高，1周后逐渐降低到一个稳定水平。而当高氧暴露后，虽然大鼠肺内GR表达在生后ld和3d时与对照组无显著性差异（n二8，P>0.05），但是表达呈现下降趋势，在生后7d时显著低于对照组（n二8，P=0.加3），在生后14d和21d时两组之间无显著性差异（n二8，P>0.05）。，、tem blot分析也显示高氧暴露后，实验组3d时与对照组无显著性差异，在7d时显著低于对照组平均水平，在14d时两组之间无显著性差异，在相同的时间点的结果与免疫组化结果相一致。结论 高氧基露对早产大鼠的肺产生类似于人类BPD的病理损伤。高氧暴露对早产大鼠的血清皮质醇浓度和肺内GR表达有明显影响，可能参与肺损伤的发生过程，将影响外源的糖皮质激素的疗效。